-
Aromaterapia Eukalipto hosto olio esentzial natural purua gorputzaren azala zaintzeko
Erauzketa edo prozesatzeko metodoa: lurrun bidezko destilazioa
Destilazio erauzketa zatia: hostoa
Jatorrizko herrialdea: Txina
Aplikazioa: Difusioa/aromaterapia/masajea
Iraupena: 3 urte
Zerbitzu pertsonalizatua: etiketa eta kutxa pertsonalizatuak edo zure eskakizunaren arabera
Ziurtagiria: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Eukalipto olioak mukiarekin erreakzionatzen du eta askatzen du, arnasestua eta beste arnas arazo batzuk berehala arintzeko. Intsektuen uxatzaile gisa jarduteko bezain indartsua da. Aromaterapian erabiltzen denean, pentsamenduen argitasuna ematen du. Bere onura terapeutikoak bere propietate antimikrobiano, antibakteriano, antiseptiko, antiespasmodiko eta birusen aurkakoei zor zaizkie. Erabili eukalipto olioa hainbat larruazaleko eta osasun arazoren aurka. Eukaliptola dauka, zineola bezala ere ezagutzen dena. Konposatu honek zure osasun eta ongizate orokorra lagunduko du.
-
Larruazala zaintzeko aromaterapiarako izpiliku olio esentzial organiko puru naturala
Erauzketa edo prozesatzeko metodoa: Lurrun bidezko destilazioa
Destilazio erauzketa zatia: Lorea
Jatorrizko herrialdea: Txina
Aplikazioa: Difusioa/aromaterapia/masajea
Iraupena: 3 urte
Zerbitzu pertsonalizatua: etiketa eta kutxa pertsonalizatuak edo zure eskakizunaren arabera
Ziurtagiria: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
%100 Magnoliae Officimalis Cortex olio organiko natural purua, larruazala zaintzeko olio esentziala
Hou Poren usaina berehala mingotsa eta zorrotz sarkorra da, eta gero pixkanaka gozotasun eta bero sakon eta almibaratu batekin irekitzen da.
Hou Po-ren afinitatea Lurrarekin eta Metal elementuekin da, non bere berotasun mingotsak Qi-a eta hezetasun lehorra jaisteko indarrez eragiten duen. Ezaugarri hauek direla eta, txinatar medikuntzan erabiltzen da digestio-aparatuan geldiunea eta metaketa arintzeko, baita flemak birikak oztopatzen dituen eztula eta txistu-arnasa arintzeko ere.
Magnolia Officinials Sichuan, Hubei eta Txinako beste probintzia batzuetako mendi eta haranetako zuhaitz hostogalkorra da. Txinako medikuntza tradizionalean erabiltzen den azal oso aromatikoa zurtoinetatik, adarretatik eta sustraietatik kentzen da eta apiriletik ekainera bitartean biltzen da. Azal lodi eta leuna, olioz betea, barruko aldean kolore morea du, kristal itxurako distira batekin.
Praktikatzaileek Hou Po Qing Pi olio esentzialarekin konbinatzea kontuan hartu dezakete metaketak hausteko helburu duten nahasketetan nota nagusien osagarri gisa.
-
OEM neurrira egindako pakete naturala Macrocephalae Rhizoma olioa
Kimioterapia-agente eraginkor gisa, 5-fluorouraziloa (5-FU) oso erabilia da digestio-aparatuko, buruko, lepoko, bularreko eta obulutegiko tumore gaiztoak tratatzeko. Eta 5-FUa da lehen lerroko sendagaia koloneko eta ondesteko minbiziaren aurka klinikan. 5-FUaren ekintza-mekanismoa urazil azido nukleikoa timina azido nukleiko bihurtzea blokeatzea da tumore-zeluletan, eta ondoren DNAren eta RNAren sintesian eta konponketan eragina izatea bere efektu zitoxikoa lortzeko (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). Hala ere, 5-FUak kimioterapiak eragindako beherakoa (CID) ere sortzen du, paziente askori eragiten dien albo-ondorio ohikoenetako bat (Filho et al., 2016). 5-FU-rekin tratatutako pazienteen beherakoaren intzidentzia % 50-80 artekoa izan zen, eta horrek kimioterapiaren aurrerapenean eta eraginkortasunean eragin handia izan zuen (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Ondorioz, oso garrantzitsua da 5-FU-k eragindako KIDrako terapia eraginkorra aurkitzea.
Gaur egun, botikarik gabeko esku-hartzeak eta botika-interbentzioak inportatu dira BGIren tratamendu klinikora. Botikarik gabeko esku-hartzeen artean, dieta arrazoizkoa eta gatza, azukrea eta beste mantenugai batzuk gehitzea daude. Loperamida eta oktreotida bezalako botikak erabili ohi dira BGIren beherakoaren aurkako terapian (Benson et al., 2004). Horrez gain, etnomedikuntzak ere erabiltzen dira BGI tratatzeko, beren terapia bereziarekin, hainbat herrialdetan. Txinako medikuntza tradizionala (TCM) 2000 urte baino gehiagoz praktikatu den etnomedikuntza tipikoa da Ekialdeko Asiako herrialdeetan, besteak beste, Txinan, Japonian eta Korean (Qi et al., 2010). TCMk dio kimioterapia-botikek Qi kontsumoa, barearen gabezia, urdaileko desoreka eta hezetasun endofitikoa eragingo lituzketela, eta horrek hesteen disfuntzio eroalea eragiten duela. TCM teorian, BGIren tratamendu-estrategia batez ere Qi osatzean eta barearen indartzean oinarritu behar da (Wang et al., 1994).
Sustrai lehorrak.Atractylodes macrocephalaKoidz. (AM) etaPanax ginsengCA Mey. (PG) TCMn ohiko belar-sendagaiak dira, Qi osatzeko eta barearen indartzeko efektu berdinak dituztenak (Li et al., 2014). AM eta PG normalean belar bikote gisa erabiltzen dira (Txinako belarren bateragarritasunaren forma sinpleena), Qi osatzeko eta barearen indartzeko efektuak dituztenak beherakoa tratatzeko. Adibidez, AM eta PG beherakoaren aurkako formula klasikoetan dokumentatu dira, hala nola Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang-en...Taiping Huimin Heji Ju Fang(Song dinastia, Txina) eta Bu Zhong Yi Qi TangPi Wei Lun(Yuan dinastia, Txina) (1. irudia). Aurreko hainbat ikerketek jakinarazi dute hiru formulek EKI arintzeko gaitasuna dutela (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Horrez gain, gure aurreko ikerketak erakutsi zuen AM eta PG bakarrik dituen Shenzhu kapsulak beherakoaren, kolitisaren (xiexie sindromea) eta beste digestio-aparatu batzuetako gaixotasunen tratamenduan eragin potentziala duela (Feng et al., 2018). Hala ere, ez dago inongo ikerketak AM eta PG-ren eragina eta mekanismoa aztertu EKI tratatzeko, konbinatuta edo bakarrik izan.
Orain, hesteetako mikrobiota faktore potentzialtzat hartzen da TCMren mekanismo terapeutikoa ulertzeko (Feng et al., 2019). Ikerketa modernoek adierazten dute hesteetako mikrobiotak funtsezko zeregina duela hesteetako homeostasia mantentzeko. Hesteetako mikrobiota osasuntsuak hesteetako mukosaren babesean, metabolismoan, immunitate-homeostasia eta erantzunean eta patogenoen ezabapenean laguntzen du (Thursby eta Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Hesteetako mikrobiota desordenatuak giza gorputzaren funtzio fisiologiko eta immunitarioak kaltetzen ditu zuzenean edo zeharka, beherakoa bezalako albo-erreakzioak eraginez (Patel et al., 2016; Zhao eta Shen, 2010). Ikerketek erakutsi dute 5-FU-k nabarmen aldatzen zuela hesteetako mikrobiotaren egitura beherakoa zuten saguetan (Li et al., 2017). Beraz, AM eta PM-k 5-FU-k eragindako beherakoan duten eragina hesteetako mikrobiotak eragin dezake. Hala ere, oraindik ezezaguna da AM eta PG-k bakarrik eta konbinatuta 5-FU-k eragindako beherakoa prebenitu dezaketen hesteetako mikrobiota modulatuz.
AM eta PG-ren beherakoaren aurkako efektuak eta azpiko mekanismoa ikertzeko, 5-FU erabili genuen saguetan beherako eredu bat simulatzeko. Hemen, administrazio bakarraren eta konbinatuaren (AP) ondorio potentzialetan zentratu ginen.Atractylodes macrocephalaolio esentziala (AMO) etaPanax ginsengsaponina totalak (PGS), AM eta PG-tik ateratako osagai aktiboak, beherakoan, hesteetako patologian eta 5-FU kimioterapiaren ondoren mikrobioen egituran.
-
%100eko Eucommiae Foliuml olio natural purua, larruazala zaintzeko olio esentziala
Eucommia ulmoides(EU) (txineraz "Du Zhong" deitua) Eucommiaceae familiakoa da, Txinako erdialdeko zuhaitz txiki baten generokoa [1]. Landare hau oso hedatuta dago Txinan, bere garrantzi medizinalagatik. 112 konposatu inguru isolatu dira EUtik, besteak beste, lignanoak, iridoideak, fenolikoak, esteroideak eta beste konposatu batzuk. Landare honen belar osagarrien formulak (te goxoa adibidez) propietate medizinal batzuk erakutsi ditu. EUren hostoak jarduera handiagoa du kortexarekin, lorearekin eta fruituarekin lotuta [2,3]. EBko hostoek hezurren indarra eta gorputzeko muskuluak hobetzen dituztela jakinarazi da [4], eta horrela, gizakien bizitza luzeagoa lortzen da eta ugalkortasuna hobetzen da [5]. EBren hostotik egindako te goxoaren formulak gantzak murrizten eta energia-metabolismoa hobetzen duela jakinarazi da. Flavonoide konposatuek (rutina, azido klorogenikoa, azido ferulikoa eta azido kafeikoa bezalakoek) antioxidatzaileen jarduera erakusten dutela jakinarazi da EBren hostoetan [6].
EUren propietate fitokimikoei buruzko literatura nahikoa egon den arren, EUren azaletatik, hazietatik, zurtoinetatik eta hostoetatik ateratako konposatu desberdinen propietate farmakologikoei buruzko ikerketa gutxi daude. Berrikuspen-lan honek EUren atal desberdinetatik (azalak, haziak, zurtoina eta hostoa) ateratako konposatu desberdinei buruzko informazio zehatza eta konposatu horien erabilera potentzialak argituko ditu osasuna sustatzen duten propietateetan, ebidentzia zientifikoaren ildoekin, eta, horrela, EUren aplikaziorako erreferentzia-materiala emango du.
-
Houttuynia cordata olio natural purua Houttuynia Cordata olioa Lchthammolum olioa
Garapen bidean dauden herrialde gehienetan, biztanleriaren % 70-95ek sendagai tradizionalen menpe daude lehen mailako osasun-laguntzarako, eta horietatik % 85ek landareak edo haien erauzketak erabiltzen dituzte substantzia aktibo gisa.1Landareetatik eratorritako konposatu biologikoki aktibo berrien bilaketa normalean tokiko profesionalengandik lortutako informazio etniko eta herrikoiaren araberakoa da, eta oraindik ere sendagaiak aurkitzeko iturri garrantzitsutzat hartzen da. Indian, gutxi gorabehera 2000 sendagai landare-jatorrikoak dira.2] Landare sendagarriak erabiltzearen inguruko interes zabala ikusita, oraingo berrikuspenaHouttuynia cordataThunb.-ek informazio eguneratua eskaintzen du literaturan agertzen diren ikerketa botaniko, komertzial, etnofarmakologiko, fitokimiko eta farmakologikoei erreferentzia eginez.H. cordataThumb. familiakoa da.Saururaceaeeta txinatar musker-buztana bezala ezagutzen da. Bi kimiotipo desberdin dituen errizoma estoloniferodun belar iraunkorra da.3,4Espeziearen txinatar kemiotipoa Indiako ipar-ekialdean aurkitzen da, apiriletik irailera, baldintza basatietan eta erdi-basatietan.5,6,7]H. cordataIndian eskuragarri dago, batez ere Assamgo Brahmaputra haranean, eta Assamgo hainbat tribuk erabiltzen dute barazki moduan eta tradizionalki hainbat helburu sendagarritan.
-
%100eko Arctium lappa olio purua fabrikatzailea – Kalitate Bermatzeko Ziurtagiriak dituen Arctium lappa olio naturala
Osasun onurak
Bardana erroa askotan jaten da, baina lehortu eta tea egiteko ere erabil daiteke. Inulina iturri gisa oso ondo funtzionatzen du,prebiotikodigestioa laguntzen duen eta hesteetako osasuna hobetzen duen zuntza. Gainera, sustrai honek flavonoideak (landareen mantenugaiak) ditu,fitokimikoak, eta osasunerako onurak dituztela ezagutzen diren antioxidatzaileak.
Horrez gain, bardana sustraiak beste onura batzuk ere eman ditzake, hala nola:
Hantura kronikoa murriztu Bardana sustraiak hainbat antioxidatzaile ditu, hala nola, kuerzetina, azido fenolikoak eta luteolina, eta horiek zure zelulak babesten lagun dezakete.erradikal askeakAntioxidatzaile hauek gorputz osoko hantura murrizten laguntzen dute.
Osasun Arriskuak
Bardana erroa segurutzat jotzen da te gisa jan edo edateko. Hala ere, landare honek belladonna solana landareen antza handia du, toxikoak baitira. Gomendagarria da bardana erroa saltzaile fidagarrietatik bakarrik erostea eta norberak ez biltzea. Gainera, informazio gutxi dago haurrengan edo haurdun dauden emakumeengan dituen ondorioei buruz. Hitz egin zure medikuarekin bardana erroa haurrekin edo haurdun bazaude erabili aurretik.
Hona hemen bardana erroa erabiltzean kontuan hartu beharreko beste osasun arrisku batzuk:
Deshidratazio handiagoa
Bardana sustraiak diuretiko natural baten antzera jokatzen du, eta horrek deshidratazioa eragin dezake. Ur-pilulak edo beste diuretiko batzuk hartzen badituzu, ez zenuke bardana sustrairik hartu behar. Medikamentu hauek hartzen badituzu, garrantzitsua da deshidratazioa eragin dezaketen beste droga, belar eta osagai batzuen berri izatea.
Erreakzio alergikoa
Margarita, ambrosia edo krisantemoekiko sentikorra bazara edo erreakzio alergikoak izan badituzu, bardana sustraiarekiko erreakzio alergikoa izateko arrisku handiagoa duzu.
-
Handizkako prezioa %100eko AsariRadix eta Rhizoma olio purua, aromaterapia erlaxatzeko, Eucalyptus globulus
Animalien eta in vitro ikerketek sasafrasen eta haren osagaien onddoen aurkako, hanturaren aurkako eta kardiobaskular efektu potentzialak ikertu dituzte. Hala ere, entsegu klinikorik ez dago, eta sasafrasen erabilera ez da segurutzat jotzen. Safrola, sasafrasen sustrai-azalaren eta olioaren osagai nagusia, AEBetako Elikagai eta Droga Administrazioak (FDA) debekatu du, zapore edo lurrin gisa erabiltzeko barne, eta ez da barnean edo kanpoan erabili behar, potentzialki kartzinogenoa baita. Safrola 3,4-metileno-dioximetanfetaminaren (MDMA) ekoizpen ilegalean erabili da, "extasy" edo "Molly" kaleko izenekin ere ezagutzen dena, eta safrola eta sasafrasen olioaren salmenta AEBetako Droga Kontrolerako Administrazioak kontrolatzen du.
-
Handizkako prezioa %100eko Stellariae Radix olio esentzial purua (berria) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Txinako Farmakopeak (2020ko edizioa) eskatzen du YCH-ren metanol-estraktua ez dela % 20,0 baino txikiagoa izan behar [2], beste kalitate-ebaluazio adierazlerik zehaztu gabe. Ikerketa honen emaitzek erakusten dute lagin basati eta landuen metanol-estraktuen edukiak farmakopearen estandarra betetzen zuela, eta ez zegoela alde nabarmenik haien artean. Beraz, ez zegoen kalitate-alde nabarmenik lagin basati eta landuen artean, indize horren arabera. Hala ere, lagin basatietan esterol eta flavonoide totalen edukia landutako laginetan baino nabarmen handiagoa zen. Metabolomikako analisi gehiagok metabolitoen aniztasun handia agerian utzi zuen lagin basati eta landuen artean. Horrez gain, 97 metabolito nabarmen desberdin baztertu ziren, zerrendan daudenak...S2 taula osagarriaMetabolito desberdin horien artean, β-sitosterola (ID M397T42 da) eta kuerzetina deribatuak (M447T204_2) daude, osagai aktibo gisa jakinarazi direnak. Aurretik jakinarazi gabeko osagaiak ere sartu ziren metabolito desberdinen artean, hala nola trigonelina (M138T291_2), betaina (M118T277_2), fustina (M269T36), rotenona (M241T189), arktiina (M557T165) eta azido loganikoa (M399T284_2). Osagai hauek hainbat funtzio betetzen dituzte oxidazioaren aurkako, hanturaren aurkako, erradikal askeak kentzeko, minbiziaren aurkako eta aterosklerosia tratatzeko, eta, beraz, YCH-n ustezko osagai aktibo berriak izan daitezke. Osagai aktiboen edukiak zehazten du sendagaien eraginkortasuna eta kalitatea [7]. Laburbilduz, metanol-estraktuak YCH kalitatearen ebaluazio-indize bakarra den aldetik muga batzuk ditu, eta kalitate-markatzaile espezifikoagoak gehiago aztertu behar dira. Esterol totaletan, flavonoide totaletan eta beste metabolito diferentzial askoren edukian alde nabarmenak zeuden YCH basatiaren eta landuaren artean; beraz, baliteke kalitate-desberdintasun batzuk egotea haien artean. Aldi berean, YCH-n aurkitu berri diren osagai aktibo potentzialek erreferentzia-balio garrantzitsua izan dezakete YCH-ren oinarri funtzionala aztertzeko eta YCH baliabideen garapen gehiagorako.
Jatorrizko eskualde zehatzean aitortu da benetako sendagaien garrantzia kalitate handiko txinatar belar sendagaiak ekoizteko [8]. Kalitate handia benetako sendagaien ezaugarri ezinbestekoa da, eta habitata material horien kalitatean eragina duen faktore garrantzitsua da. YCH sendagai gisa erabiltzen hasi zenetik, YCH basatiak izan du nagusitasun handiena. 1980ko hamarkadan Ningxian YCH arrakastaz sartu eta etxekotu ondoren, Yinchaihuko sendagaien iturria pixkanaka YCH basatitik landutakora aldatu zen. YCH iturriei buruzko aurreko ikerketa baten arabera [9] eta gure ikerketa-taldearen landa-ikerketan, alde nabarmenak daude landutako eta basatiko sendagaien banaketa-eremuetan. YCH basatia batez ere Shaanxi probintziako Ningxia Hui Eskualde Autonomoan banatzen da, Barne Mongoliako eremu idorraren eta Ningxia erdialdearen ondoan. Bereziki, eremu horietako basamortuko estepa da YCH hazteko habitat egokiena. Aldiz, landutako YCH banaketa-eremu basatiaren hegoaldean banatzen da batez ere, hala nola Tongxin konderrian (Landutako I) eta inguruko eremuetan, Txinako laborantza eta ekoizpen-oinarririk handiena bihurtu dena, eta Pengyang konderrian (Landutako II), hegoaldeko eremu batean kokatua eta landutako YCH ekoizteko beste eremu bat dena. Gainera, aipatutako bi landutako eremuen habitatak ez dira basamortuko estepa. Beraz, ekoizpen-moduaz gain, alde nabarmenak daude YCH basatiaren eta landutakoaren habitatean ere. Habitata belar sendagaien kalitatean eragina duen faktore garrantzitsua da. Habitat desberdinek eragina izango dute landareetan bigarren mailako metabolitoen eraketan eta metaketan, eta horrela sendagaien kalitatean [10,11]. Beraz, ikerketa honetan aurkitu ditugun flavonoide eta esterol guztien edukiaren eta 53 metabolitoen adierazpenaren arteko desberdintasun esanguratsuak landa-kudeaketaren eta habitataren arteko desberdintasunen ondorio izan daitezke.Ingurumenak sendagaien kalitatean duen eragin nagusietako bat jatorrizko landareei estresa eragitea da. Ingurumen-estres moderatuak bigarren mailako metabolitoen metaketa suspertzen du [12,13]. Hazkunde/diferentziazio orekaren hipotesiak dioenez, mantenugaiak nahikoa direnean, landareak hazten dira batez ere, eta mantenugaiak defizita dutenean, berriz, landareek bereizten dira eta bigarren mailako metabolito gehiago sortzen dituzte [14]. Uraren gabeziak eragindako lehortea da landareek eremu idorretan jasaten duten ingurumen-estres nagusia. Ikerketa honetan, landutako YCH-aren ur-baldintza ugariagoa da, urteko prezipitazio-mailak YCH basatienak baino nabarmen handiagoak izanik (Landutako I-aren ur-hornidura Basatiarena baino 2 aldiz handiagoa zen gutxi gorabehera; Landutako II-arena Basatiarena baino 3,5 aldiz handiagoa). Gainera, ingurune basatiko lurzorua hareatsua da, baina nekazaritza-lurzorukoa buztintsua da. Buztinarekin alderatuta, lurzoru hareatsuak ura atxikitzeko gaitasun eskasa du eta lehorte-estresa areagotzeko aukera gehiago du. Aldi berean, laborantza-prozesua askotan ureztatzearekin batera gertatzen zen, beraz, lehorte-estres maila baxua zen. YCH basatia habitat idor natural gogorretan hazten da, eta, beraz, lehorte-estres larriagoa jasan dezake.Osmoregulazioa landareek lehorte-estresari aurre egiteko erabiltzen duten mekanismo fisiologiko garrantzitsua da, eta alkaloideak goi-mailako landareetan erregulatzaile osmotiko garrantzitsuak dira.15]. Betainak uretan disolbagarriak diren alkaloide amonio kuaternario konposatuak dira eta osmobabesle gisa joka dezakete. Lehorteak zelulen potentzial osmotikoa murriztu dezake, osmobabesleek, berriz, makromolekula biologikoen egitura eta osotasuna kontserbatzen eta mantentzen dituzte, eta lehorteak landareei eragindako kalteak eraginkortasunez arintzen dituzte [16]. Adibidez, lehorte-estresaren pean, azukre-erremolatxaren eta Lycium barbarum-en betaina-edukia nabarmen handitu zen [17,18]. Trigonelina zelulen hazkuntzaren erregulatzailea da, eta lehorte-estresaren pean, landare-zelulen zikloaren iraupena luzatu, zelulen hazkuntza inhibitatu eta zelulen bolumenaren txikitzea eragin dezake. Zelulako solutu-kontzentrazioaren igoera erlatiboak landareari erregulazio osmotikoa lortzeko eta lehorte-estresari aurre egiteko gaitasuna hobetzeko aukera ematen dio [19]. JIA X [20] aurkitu zuten lehorte-estresaren igoerarekin, Astragalus membranaceus-ek (Txinako medikuntza tradizionalaren iturria) trigonellina gehiago sortzen zuela, eta horrek potentzial osmotikoa erregulatzen eta lehorte-estresari aurre egiteko gaitasuna hobetzen du. Flavonoideek ere zeregin garrantzitsua dutela frogatu da landareen lehorte-estresarekiko erresistentzian [21,22]. Ikerketa askok baieztatu dute lehorte-estres moderatuak flavonoideen metaketa eragiten duela. Lang Duo-Yong et al. [23] lehorte-estresak YCH-n dituen efektuak alderatu zituen, soroan ura atxikitzeko gaitasuna kontrolatuz. Ikusi zen lehorte-estresak sustraien hazkuntza neurri batean inhibitzen zuela, baina lehorte-estres moderatu eta larrian (soroan ura atxikitzeko gaitasunaren % 40), YCH-ko flavonoideen edukia handitu egin zen. Bitartean, lehorte-estresaren pean, fitoesteroleek zelula-mintzaren fluidotasuna eta iragazkortasuna erregulatzen, ur-galera inhibitzen eta estresarekiko erresistentzia hobetzen jardun dezakete [24,25]. Beraz, YCH basatian flavonoide totalen, esterol totalen, betainaren, trigonelinaren eta beste metabolito sekundario batzuen metaketa areagotzea lehorte-estres intentsiboarekin erlazionatuta egon liteke.Ikerketa honetan, KEGG bidearen aberaste-analisia egin zen YCH basatiaren eta landuaren artean nabarmen desberdinak zirela ikusi zen metabolitoetan. Aberastutako metabolitoen artean askorbato eta aldarato metabolismoaren, aminoazil-tRNA biosintesiaren, histidinaren metabolismoaren eta beta-alaninaren metabolismoaren bideetan parte hartzen dutenak zeuden. Bide metaboliko hauek landareen estresarekiko erresistentzia-mekanismoekin estuki lotuta daude. Horien artean, askorbatoaren metabolismoak zeregin garrantzitsua du landareen antioxidatzaileen ekoizpenean, karbono eta nitrogeno metabolismoan, estresarekiko erresistentzian eta beste funtzio fisiologiko batzuetan [26]; aminoazil-tRNA biosintesia proteinen eraketarako bide garrantzitsua da [27,28], estresarekiko erresistenteak diren proteinen sintesian parte hartzen duena. Histidina eta β-alanina bideek landareen ingurumen-estresarekiko tolerantzia hobetu dezakete [29,30]. Horrek are gehiago adierazten du YCH basatiaren eta landuaren arteko metabolitoen arteko desberdintasunak estresarekiko erresistentzia prozesuekin estuki lotuta zeudela.Lurzorua da sendabelarren hazkuntza eta garapenerako oinarri materiala. Lurzoruko nitrogenoa (N), fosforoa (P) eta potasioa (K) landareen hazkuntza eta garapenerako mantenugai-elementu garrantzitsuak dira. Lurzoruko materia organikoak N, P, K, Zn, Ca, Mg eta sendabelarrentzako beharrezkoak diren beste makroelementu eta oligoelementu batzuk ere baditu. Mantenugai gehiegi edo gabeziak, edo mantenugai-proportzio desorekatuek, eragina izango dute sendabelarren hazkuntzan eta garapenean eta kalitatean, eta landare ezberdinek mantenugai-behar desberdinak dituzte.31,32,33]. Adibidez, N estres baxuak alkaloideen sintesia sustatu zuen Isatis indigotican, eta onuragarria izan zen flavonoideen metaketan Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge eta Dichondra repens Forst bezalako landareetan. Aitzitik, N gehiegi izateak flavonoideen metaketa inhibitzen zuen Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis eta Ginkgo biloba bezalako espezieetan, eta sendagaien kalitatea kaltetzen zuen [34]. P ongarriaren aplikazioa eraginkorra izan zen Uralgo regalizetan azido glizirriziko eta dihidroazetona edukia handitzeko [35]. Aplikazio-kopurua 0,12 kg·m−2 baino handiagoa zenean, Tussilago farfara-ren flavonoideen edukia gutxitu egin zen [36]. P ongarri baten aplikazioak eragin negatiboa izan zuen txinatar medikuntza tradizionaleko rhizoma polygonati-ko polisakaridoen edukian [37], baina K ongarri bat eraginkorra izan zen saponinen edukia handitzeko [38]. 450 kg·hm−2 K ongarria aplikatzea izan zen onena bi urteko Panax notoginseng-aren hazkuntzarako eta saponina metaketarako [39]. N:P:K = 2:2:1 erlazioaren pean, erauzkin hidrotermalaren, harpagidaren eta harpagosidoaren kantitate osoak izan ziren altuenak [40]. N, P eta K proportzio altuak Pogostemon cablin-en hazkuntza sustatzeko eta olio lurrunkorren edukia handitzeko onuragarria izan zen. N, P eta K proportzio baxuak Pogostemon cablin zurtoin hosto olioaren osagai eraginkor nagusien edukia handitu zuen [41]. YCH lurzoru antzuarekiko tolerantzia handiko landarea da, eta N, P eta K bezalako mantenugaien beharrizan espezifikoak izan ditzake. Ikerketa honetan, landutako YCHarekin alderatuta, YCH landare basatien lurzorua nahiko antzua zen: materia organikoaren, N totalaren, P totalaren eta K totalaren lurzoruko edukia landutako landareena baino 1/10, 1/2, 1/3 eta 1/3 ingurukoa zen, hurrenez hurren. Beraz, lurzoruko mantenugaien arteko desberdintasunak izan daitezke landutako eta basatitako YCH-an detektatutako metabolitoen arteko desberdintasunen beste arrazoi bat. Weibao Ma et al. [42]-k aurkitu zuen N ongarri eta P ongarri kopuru jakin bat aplikatzeak hazien uzta eta kalitatea nabarmen hobetzen zituela. Hala ere, elementu nutritiboek YCHren kalitatean duten eragina ez dago argi, eta sendagaien kalitatea hobetzeko ongarritze neurriak gehiago aztertu behar dira.Txinako belar-sendagaiek ezaugarri hauek dituzte: "Habitat onuragarriek etekina sustatzen dute, eta habitat kaltegarriek kalitatea hobetzen dute".43]. YCH basatitik landutakora pixkanaka igarotzean, landareen habitata basamortuko estepa idor eta antzuetatik ur ugariagoko nekazaritza-lur emankorretara aldatu zen. YCH landuaren habitata hobea da eta errendimendua handiagoa, eta hori lagungarria da merkatuaren eskaria asetzeko. Hala ere, habitat hobetu honek aldaketa nabarmenak ekarri zituen YCHren metabolitoetan; horrek YCHren kalitatea hobetzeko balio duen eta zientzian oinarritutako landaketa-neurrien bidez YCHren kalitate handiko ekoizpena nola lortu jakiteko, ikerketa gehiago beharko dira.Habitat-laborantza simulatzailea landare sendagarri basatien habitata eta ingurumen-baldintzak simulatzeko metodo bat da, landareek ingurumen-estres espezifikoetara duten epe luzeko egokitzapenaren ezagutzan oinarrituta.43]. Landare basatiei eragiten dieten hainbat ingurumen-faktore simulatuz, batez ere benetako sendagaien iturri gisa erabiltzen diren landareen jatorrizko habitata, ikuspegiak diseinu zientifikoa eta gizakiaren esku-hartze berritzailea erabiltzen ditu Txinako sendabelarren hazkuntza eta bigarren mailako metabolismoa orekatzeko [43]. Metodoek kalitate handiko sendagaiak garatzeko antolamendu optimoak lortzea dute helburu. Habitataren laborantza simulatuak YCHren kalitate handiko ekoizpenerako modu eraginkorra eskaini beharko luke, oinarri farmakodinamikoa, kalitate-markatzaileak eta ingurumen-faktoreei erantzuteko mekanismoak argi ez daudenean ere. Horrenbestez, iradokitzen dugu YCHren laborantzan eta ekoizpenean diseinu zientifikoa eta landa-kudeaketa neurriak YCH basatiaren ingurumen-ezaugarriak kontuan hartuta egin behar direla, hala nola lurzoru idor, antzu eta hareatsuak. Aldi berean, espero da ikertzaileek YCHren material funtzionalaren oinarriari eta kalitate-markatzaileei buruzko ikerketa sakonagoa egitea. Ikerketa hauek YCHren ebaluazio-irizpide eraginkorragoak eman ditzakete, eta industriaren kalitate handiko ekoizpena eta garapen jasangarria sustatu. -
Belar Fructus Amomi olioa Masaje naturalaren difusoreak 1kg Amomum villosum olio esentziala
Zingiberaceae familiak gero eta arreta handiagoa erakarri du ikerketa alelopatikoan, bere kide diren espezieen olio lurrunkor aberatsengatik eta aromatikotasunagatik. Aurreko ikerketek erakutsi zuten Curcuma zedoaria (zedoarioa)-tik datozen produktu kimikoak [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BBLurtt eta RMSm. [41] eta Zingiber officinale Rosc. [42] jengibre familiakoek efektu alelopatikoak dituzte artoaren, letxugaren eta tomatearen hazien ernetzean eta landareen hazkuntzan. Gure egungo ikerketa A. villosum-en (Zingiberaceae familiako kidea) zurtoin, hosto eta fruitu gazteetako lurrunkorren jarduera alelopatikoari buruzko lehen txostena da. Zurtoinen, hostoen eta fruitu gazteen olio-errendimendua % 0,15, % 0,40 eta % 0,50 izan zen, hurrenez hurren, eta horrek adierazten du fruituek olio lurrunkor gehiago sortzen zutela zurtoinek eta hostoek baino. Zurtoinetako olio lurrunkorren osagai nagusiak β-pinenoa, β-felandrenoa eta α-pinenoa ziren, hosto-olioaren produktu kimiko nagusien, β-pinenoaren eta α-pinenoaren (monoterpeno hidrokarburoak) antzeko eredua izanik. Bestalde, fruitu gazteetako olioa bornil azetatoan eta kanforrean aberatsa zen (oxigenatutako monoterpenoak). Emaitzak Do N Dai-ren aurkikuntzek babestu zituzten [30,32] eta Hui Ao [31] A. villosum-en organo desberdinetako olioak identifikatu zituena.
Konposatu nagusi hauen landareen hazkuntza inhibitzeko jarduerei buruzko hainbat txosten egin dira beste espezie batzuetan. Shalinder Kaurrek aurkitu zuen eukaliptotik eratorritako α-pinenoak nabarmen murrizten zituela Amaranthus viridis L.-ren sustraien luzera eta kimuen altuera 1,0 μL-ko kontzentrazioan [43], eta beste ikerketa batek erakutsi zuen α-pinenoak sustraien hazkuntza goiztiarra inhibitzen zuela eta kalte oxidatiboak eragiten zituela sustraien ehunean oxigeno espezie erreaktiboen sorrera handituz [44]. Txosten batzuek argudiatu dute β-pinenoak probako belar txarren ernetzea eta landareen hazkuntza inhibitzen dituela dosiaren araberako erantzun moduan, mintzaren osotasuna etenez [45], landareen biokimika aldatuz eta peroxidasen eta polifenol oxidasen jarduerak hobetuz [46]. β-Fellandrenoak Vigna unguiculata (L.) Walp-en ernetzearen eta hazkuntzaren inhibizio handiena erakutsi zuen 600 ppm-ko kontzentrazioan [47], eta, 250 mg/m3-ko kontzentrazioan, kanforrak Lepidium sativum L.-ren erradikulu eta kimuen hazkundea murriztu zuen [48]. Hala ere, bornil azetatoaren efektu alelopatikoari buruzko ikerketak urriak dira. Gure ikerketan, β-pinenoaren, bornil azetatoaren eta kanforraren efektu alelopatikoak sustraien luzeran ahulagoak izan ziren olio lurrunkorrenak baino, α-pinenoa izan ezik, eta hosto-olioa, α-pinenoan aberatsa, A. villosum-en zurtoin eta fruituetako olio lurrunkorrak baino fitotoxikoagoa izan zen, eta bi aurkikuntzek adierazten dute α-pinenoa espezie honen alelopatiaren substantzia kimiko garrantzitsua izan daitekeela. Aldi berean, emaitzek ere iradokitzen zuten fruitu-olioan ugariak ez ziren konposatu batzuek efektu fitotoxikoaren ekoizpenean lagun zezaketela, eta aurkikuntza hori etorkizunean ikerketa gehiago behar dira.Baldintza normaletan, alelokimikoen efektu alelopatikoa espezie espezifikoa da. Jiang et al.-ek aurkitu zuten Artemisia sieversiana-k ekoitzitako olio esentzialak eragin indartsuagoa zuela Amaranthus retroflexus L.-n Medicago sativa L., Poa annua L. eta Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng-en baino.49]. Beste ikerketa batean, Lavandula angustifolia Mill.-en olio lurrunkorrak efektu fitotoxiko maila desberdinak sortu zituen landare-espezie desberdinetan. Lolium multiflorum Lam. izan zen hartzaile-espezie sentikorrena, hipokotiloaren eta erradikuluaren hazkundea % 87,8 eta % 76,7 inhibitzen baitzen, hurrenez hurren, 1 μL/mL olioko dosian, baina pepino-landareen hipokotiloaren hazkundea ia ez zen eraginik izan [20]. Gure emaitzek ere erakutsi zuten L. sativa eta L. perenne artean A. villosum lurrunkorrekiko sentikortasunean aldea zegoela.Espezie bereko konposatu lurrunkorrak eta olio esentzialak kuantitatiboki eta/edo kualitatiboki alda daitezke hazkuntza-baldintzen, landare-atalen eta detekzio-metodoen arabera. Adibidez, txosten batek erakutsi zuen piranoidea (% 10,3) eta β-kariofilenoa (% 6,6) zirela Sambucus nigra-ren hostoetatik isurtzen ziren konposatu lurrunkorren konposatu nagusiak, eta bentzaldehidoa (% 17,8), α-bulnesenoa (% 16,6) eta tetrakosanoa (% 11,5) ugariak zirela hostoetatik ateratako olioetan [50]. Gure ikerketan, landare-material freskoek askatutako konposatu lurrunkorrek efektu alelopatiko sendoagoak izan zituzten proba-landareetan, erauzitako olio lurrunkorrek baino, erantzun-desberdintasunak bi prestakinetan dauden alelokimikoen arteko desberdintasunekin estuki lotuta baitaude. Konposatu lurrunkorren eta olioen arteko desberdintasun zehatzak gehiago ikertu behar dira ondorengo esperimentuetan.Lurzoruko laginetan olio lurrunkorrak gehitu zitzaizkien mikrobioen aniztasunean eta mikrobioen komunitatearen egituran dauden desberdintasunak mikroorganismoen arteko lehiarekin, baita lurzoruan olio lurrunkorren efektu toxikoekin eta iraupenarekin ere lotuta zeuden. Vokou eta Liotiri [51] aurkitu zuen lau olio esentzial (0,1 mL) lur landuari (150 g) aplikatzeak lurzoru laginen arnasketa aktibatu zuela, olioen konposizio kimikoa desberdina izan arren, eta horrek iradokitzen du landare-olioak lurzoruko mikroorganismoek karbono eta energia iturri gisa erabiltzen dituztela. Oraingo ikerketatik lortutako datuek baieztatu zuten A. villosum landare osoko olioek lurzoruko onddo espezieen kopuruaren igoera nabarmenean lagundu zutela olioa gehitu eta 14. egunera, eta horrek adierazten du olioak lurzoruko onddo gehiagorentzat karbono iturria eman dezakeela. Beste ikerketa batek aurkikuntza bat jakinarazi zuen: lurzoruko mikroorganismoek hasierako funtzioa eta biomasa berreskuratu zituzten Thymbra capitata L. (Cav) olioa gehitzeak eragindako aldakuntza aldi baterako baten ondoren, baina dosirik altuenean zegoen olioak (0,93 µL olio lurzoru gramoko) ez zien lurzoruko mikroorganismoei hasierako funtzionaltasuna berreskuratzen utzi [52]. Oraingo ikerketan, lurzoruaren analisi mikrobiologikoan oinarrituta, egun eta kontzentrazio desberdinekin tratatu ondoren, espekulatu genuen lurzoruko bakterioen komunitatea egun gehiago igaro ondoren berreskuratuko zela. Aitzitik, onddoen mikrobiota ezin da bere jatorrizko egoerara itzuli. Emaitza hauek hipotesi hau berresten dute: olioaren kontzentrazio altuak lurzoruko onddoen mikrobiomaren konposizioan duen eragin nabarmena koordenatu nagusien analisiak (PCoA) agerian utzi zuen, eta bero-mapen aurkezpenek berriro baieztatu zuten 3,0 mg/mL olioarekin tratatutako lurzoruaren onddoen komunitatearen konposizioa (hau da, 0,375 mg olio lurzoru gramoko) genero mailan beste tratamenduekin alderatuta nabarmen desberdina zela. Gaur egun, monoterpeno hidrokarburoen edo oxigenatutako monoterpenoen gehikuntzak lurzoruko mikrobioen dibertsitatean eta komunitatearen egituran dituen efektuei buruzko ikerketa oraindik urria da. Ikerketa batzuek jakinarazi zuten α-pinenoak lurzoruko mikrobioen jarduera eta Methylophilaceae (metilotrofo talde bat, Proteobacteria) ugaritasun erlatiboa handitzen zituela hezetasun eduki baxuan, lurzoru lehorragoetan karbono iturri gisa paper garrantzitsua jokatuz [53]. Era berean, A. villosum landare osoaren olio lurrunkorra, % 15,03 α-pineno duena (S1 taula osagarria), Proteobakterioen ugaritasun erlatiboa 1,5 mg/mL eta 3,0 mg/mL-tan handitu zuen, eta horrek iradokitzen du α-pinenoa lurzoruko mikroorganismoen karbono iturrietako bat izan daitekeela.A. villosum-en organo ezberdinek sortutako konposatu lurrunkorrek efektu alelopatiko maila desberdinak izan zituzten L. sativa eta L. perenne-n, eta hori estuki lotuta zegoen A. villosum landare-zatiek zituzten osagai kimikoekin. Olio lurrunkorraren konposizio kimikoa baieztatu bazen ere, A. villosum-ek giro-tenperaturan askatzen zituen konposatu lurrunkorrak ezezagunak dira, eta ikerketa gehiago behar dira. Gainera, alelokimiko ezberdinen arteko efektu sinergikoa ere kontuan hartzekoa da. Lurzoruko mikroorganismoei dagokienez, olio lurrunkorrak lurzoruko mikroorganismoengan duen eragina sakonki aztertzeko, oraindik ikerketa sakonagoa egin behar dugu: olio lurrunkorraren tratamendu-denbora luzatu eta lurzoruko olio lurrunkorraren konposizio kimikoan egun ezberdinetan dauden aldaketak antzeman. -
Artemisia capillaris olio purua kandelak eta xaboiak egiteko handizkako difusore olio esentziala kanabera erregailu difusoreetarako berria
Karraskarien ereduaren diseinua
Animaliak ausaz bost taldetan banatu ziren, bakoitza hamabost sagurekin. Kontrol taldeko eta eredu taldeko saguei gabajea eman zitzaien...sesamo olioa6 egunez. Kontrol positiboko taldeko saguei bifendato pilulak (BT, 10 mg/kg) eman zitzaizkien gabajean 6 egunez. Talde esperimentalak sesamo olioan disolbatutako 100 mg/kg eta 50 mg/kg AEOrekin tratatu ziren 6 egunez. 6. egunean, kontrol taldea sesamo olioarekin tratatu zen, eta gainerako talde guztiak sesamo olioan % 0,2ko CCl4 dosi bakarrarekin (10 ml/kg) tratatu ziren.intraperitoneal injekzioaSaguak urik gabe baraurik egin ziren, eta odol laginak bildu ziren odol-hodi retrobulbarretatik; bildutako odola 3000 × 2000-tan zentrifugatu zen.g10 minutuz seruma bereizteko.Zerbikaleko luxazioaodola atera eta berehala egin zen azterketa, eta gibeleko laginak berehala kendu ziren. Gibeleko laginaren zati bat berehala gorde zen -20 °C-tan analisia egin arte, eta beste zati bat moztu eta % 10eko likido batean finkatu zen.formalinadisoluzioa; gainerako ehunak -80 °C-tan gorde ziren analisi histopatologikoetarako (Wang eta beste batzuk, 2008,Hsu eta beste batzuk, 2009,Nie eta beste batzuk, 2015).
Serumeko parametro biokimikoen neurketa
Gibeleko lesioa kalkulatuz ebaluatu zenjarduera entzimatikoakALT eta AST serumaren neurketa, kit komertzialak erabiliz, kit-en argibideen arabera (Nanjing, Jiangsu probintzia, Txina). Jarduera entzimatikoak litroko unitate gisa (U/l) adierazi ziren.
MDA, SOD, GSH eta GSH-P-ren neurketaxgibeleko homogeneoetan
Gibel-ehunak 1:9 proportzioan (w/v, gibela:gatzoa) homogeneizatu ziren. Homogeneizatuak zentrifugatu ziren (2500 × 2500g(10 minutuz) gainnadanteak biltzeko ondorengo determinazioetarako. Gibeleko kaltea MDA eta GSH mailen gibeleko neurketen arabera ebaluatu zen, baita SOD eta GSH-P ere.xjarduerak. Hauek guztiak kiteko argibideei jarraituz zehaztu ziren (Nanjing, Jiangsu probintzia, Txina). MDA eta GSHren emaitzak proteina mg bakoitzeko nmol gisa adierazi ziren (nmol/mg prot), eta SOD eta GSH-Pren jarduerakxproteina mg bakoitzeko U (U/mg prot) gisa adierazi ziren.
Analisi histopatologikoa
Gibel berriaren zatiak % 10eko tamponatuan finkatu ziren.paraformaldehidoafosfato disoluzioa. Ondoren, lagina parafinan txertatu zen, 3-5 μm-ko sekzioetan moztu eta tindatu zenhematoxilinaetaeosina(H&E) prozedura estandar baten arabera, eta azkenik aztertutaargi-mikroskopia(Tian eta beste batzuk, 2012).
Analisi estatistikoa
Emaitzak batez besteko ± desbideratze estandarra (DE) gisa adierazi ziren. Emaitzak SPSS Statistics programa estatistikoa erabiliz aztertu ziren, 19.0 bertsioa. Datuak bariantzaren analisi baten menpe jarri ziren (ANOVA,p< 0,05) eta ondoren Dunnett-en testa eta Dunnett-en T3 testa erabili ziren hainbat talde esperimentalen balioen arteko desberdintasun estatistikoki esanguratsuak zehazteko. Desberdintasun esanguratsutzat jo zen maila bateanp< 0,05.
Emaitzak eta eztabaida
AEOren osagaiak
GC/MS analisi batean, AEOak 25 osagai zituela ikusi zen, 10 eta 35 minutu bitartean eluzioa eginda, eta olio esentzialaren % 84 osatzen zuten 21 osagai identifikatu ziren (1. taula). Barruan dagoen olio lurrunkorramonoterpenoideak(% 80,9), seskiterpenoideak (% 9,5), hidrokarburo adargabe saturatuak (% 4,86) eta azetileno mota desberdinak (% 4,86). Beste ikerketa batzuekin alderatuta (Guo eta beste batzuk, 2004), monoterpenoide ugari (% 80,90) aurkitu genituen AEOan. Emaitzek erakutsi zuten AEOaren osagairik ugariena β-zitronelola (% 16,23) dela. AEOaren beste osagai nagusi batzuk 1,8-zineola (% 13,9) dira,kanforra(% 12,59)linaloola(%11,33), α-pineno (%7,21), β-pineno (%3,99),timol(% 3,22), etamirzeno(% 2,02). Konposizio kimikoaren aldaketa landarea jasan duen ingurumen-baldintzekin erlazionatuta egon daiteke, hala nola ur mineralarekin, eguzki-argiarekin, garapen-etaparekin etanutrizioa.
-
Saposhnikovia divaricata olio purua kandelak eta xaboiak egiteko handizkako difusore olio esentziala kanabera erregailu difusoreetarako berria
2.1. SDEren prestaketa
SD-ren errizomak belar lehor gisa erosi ziren Hanherb Co.-tik (Guri, Korea). Landare-materialak taxonomikoki baieztatu zituen Koreako Medikuntza Orientaleko Institutuko (KIOM) Go-Ya Choi doktoreak. Ale bat (2014 SDE-6 zenbakia) Koreako Baliabide Belar Estandarraren Herbarioan gorde zen. SD-ren errizoma lehorrak (320 g) bi aldiz erauzi ziren % 70eko etanolarekin (2 orduko errefluxuarekin) eta ondoren erauzkin hori presio murriztuan kontzentratu zen. Dekokzioa iragazi, liofilizatu eta 4 °C-tan gorde zen. Hasierako material gordinen erauzkin lehorraren etekina % 48,13 izan zen (p/p).
2.2. Kromatografia likido errendimendu handiko (HPLC) analisi kuantitatiboa
Kromatografia-analisia HPLC sistema batekin (Waters Co., Milford, MA, AEB) eta fotodiodo-multzoko detektagailu batekin egin zen. SDEren HPLC analisirako, lehen-O-glukosilzimifugina estandarra Koreako Medikuntza Tradizionalaren Industriaren Sustapen Institututik (Gyeongsan, Korea) erosi zen, etaseg-O-glukosilhamaudol eta 4′-O-β-D-glukosil-5-OM-metilvisaminola gure laborategian isolatu eta analisi espektralen bidez identifikatu ziren, batez ere NMR eta MS bidez.
SDE laginak (0,1 mg) % 70eko etanolean (10 mL) disolbatu ziren. Kromatografia-bereizketa XSelect HSS T3 C18 zutabe batekin egin zen (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, AEB). Fase mugikorra azetonitriloz (A) eta % 0,1eko azido azetikoz (B) osatuta zegoen, 1,0 mL/min-ko emari-abiaduran. Urrats anitzeko gradiente programa bat erabili zen, honela: % 5 A (0 min), % 5-20 A (0-10 min), % 20 A (10-23 min) eta % 20-65 A (23-40 min). Detekzio-uhin-luzera 210-400 nm-tan eskaneatu eta 254 nm-tan erregistratu zen. Injekzio-bolumena 10,0 izan zen.μL. Hiru kromonak zehazteko disoluzio estandarrak 7,781 mg/mL-ko azken kontzentrazioan prestatu ziren (lehentasunezko-O-glukosilzimifugina), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-metilvisaminola), eta 31,125 mg/mL (seg-O-glukosilhamaudol) metanolean eta 4 °C-tan mantenduta.
2.3. Jarduera antiinflamatorioaren ebaluazioaIn vitro
2.3.1. Zelulen kultura eta laginen tratamendua
264.7 zelula gordinak American Type Culture Collection-etik (ATCC, Manassas, VA, AEB) lortu eta % 1eko antibiotikoak eta % 5,5eko FBS zituen DMEM medio batean hazi ziren. Zelulak % 5eko CO2-ko atmosfera heze batean inkubatu ziren 37 °C-tan. Zelulak estimulatzeko, medioa DMEM medio freskoarekin eta lipopolisakaridoarekin (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, AEB) 1 °C-tan ordezkatu zen.μg/mL gehitu zen SDEren presentzian edo gabezian (200 edo 400)μg/mL) beste 24 orduz.
2.3.2. Oxido nitrikoaren (NO), Prostaglandina E2 (PGE2), Tumoreen Nekrosi Faktorearen zehaztapena-α(TNF-α), eta Interleukin-6 (IL-6) ekoizpena
Zelulak SDErekin tratatu eta LPSrekin estimulatu ziren 24 orduz. NO ekoizpena nitritoa neurtuz aztertu zen Griess erreaktiboa erabiliz, aurreko ikerketa baten arabera [12]. PGE2 eta TNF zitokin inflamatorioen jariaketaα, eta IL-6 ELISA kit bat erabiliz zehaztu zen (I+G sistemak) fabrikatzailearen argibideen arabera. SDE-k NO eta zitokinen ekoizpenean dituen efektuak 540 nm edo 450 nm-tan zehaztu ziren Wallac EnVision bat erabiliz.™Mikroplaka irakurgailua (PerkinElmer).
2.4. Artrosiaren aurkako jardueraren ebaluazioaZuzenean
2.4.1. Animaliak
Sprague-Dawley arratoi arrak (7 astekoak) Samtako Inc.-etik (Osan, Korea) erosi eta baldintza kontrolatuetan eduki ziren, 12 orduko argi/ilun ziklo batekin.°C eta% hezetasuna. Arratoiei laborategiko dieta eta ura eman zitzaizkiennahi adinaProzedura esperimental guztiak Osasun Institutu Nazionalen (NIH) jarraibideen arabera egin ziren eta Daejeon unibertsitateko (Daejeon, Koreako Errepublika) Animalien Zaintza eta Erabilera Batzordeak onartu zituen.
2.4.2. Arratoietan MIArekin OAren indukzioa
Animaliak ausaz banatu eta tratamendu-taldeetan esleitu ziren ikerketa hasi aurretik (talde bakoitzeko). MIA disoluzioa (3 mg/50μ% 0,9ko gatz-soluzioa) zuzenean injektatu zen eskuineko belauneko artikulazio barruko espazioan, ketamina eta xilazina nahasketa batekin eragindako anestesiaren pean. Arratoiak ausaz lau taldetan banatu ziren: (1) MIA injekziorik gabeko gatz-soluzioko taldea, (2) MIA injekzioarekin MIA taldea, (3) SDEz tratatutako taldea (200 mg/kg) MIA injekzioarekin, eta (4) indometazinaz (IM) tratatutako taldea (2 mg/kg) MIA injekzioarekin. Arratoiei ahotik eman zitzaien SDE eta IM MIA injekzioa baino astebete lehenago, 4 astez. Ikerketa honetan erabilitako SDE eta IM dosia aurreko ikerketetan erabilitakoetan oinarritu zen [10,13,14].
2.4.3. Atzeko hanken pisu-banaketaren neurketak
OA indukzioaren ondoren, atzeko hanken pisu-euskarriaren jatorrizko oreka hautsi zen. Ezgaitasun-probatzaile bat (Linton instrumentation, Norfolk, Erresuma Batua) erabili zen pisu-euskarriaren tolerantziaren aldaketak ebaluatzeko. Arratoiak arretaz jarri ziren neurketa-ganberan. Atzeko gorputz-adarrak eragindako pisu-euskarriaren indarra 3 segundoko epean batez beste kalkulatu zen. Pisu-banaketa erlazioa ekuazio honen bidez kalkulatu zen: [eskuineko atzeko gorputz-adarraren pisua/(eskuineko atzeko gorputz-adarraren pisua + ezkerreko atzeko gorputz-adarraren pisua)] × 100 [15].
2.4.4. Serumeko zitokinen mailen neurketak
Odol laginak 1.500 g-tan zentrifugatu ziren 10 minutuz 4 °C-tan; ondoren, seruma bildu eta -70 °C-tan gorde zen erabili arte. IL-1 mailakβIL-6, TNF-α, eta serumeko PGE2 R&D Systems-eko (Minneapolis, MN, AEB) ELISA kitak erabiliz neurtu ziren, fabrikatzailearen argibideen arabera.
2.4.5. Denbora errealeko RT-PCR analisi kuantitatiboa
RNA osoa belauneko artikulazioko ehunetik erauzi zen TRI erreaktiboa® erabiliz (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, AEB), alderantzizko transkripzioa egin zen cDNA bihurtuz eta PCR bidez anplifikatu zen TM One Step RT PCR kit bat erabiliz, SYBR berdearekin (Applied Biosystems, Grand Island, NY, AEB). Denbora errealeko PCR kuantitatiboa Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR sistema erabiliz egin zen (Applied Biosystems, Grand Island, NY, AEB). Primer sekuentziak eta zunda-sekuentzia taulan ageri dira.1. Lagin-ADNc-en zatiak eta GAPDH ADNc kantitate berdina TaqMan® Universal PCR master nahasketarekin anplifikatu ziren, DNA polimerasa duena, fabrikatzailearen argibideen arabera (Applied Biosystems, Foster, CA, AEB). PCR baldintzak hauek izan ziren: 2 minutu 50 °C-tan, 10 minutu 94 °C-tan, 15 segundo 95 °C-tan eta 1 minutu 60 °C-tan, 40 zikloz. Helburu-genearen kontzentrazioa Ct metodo konparatiboa erabiliz zehaztu zen (anplifikazio-diagramaren eta atalasearen arteko gurutzaketa-puntuan dagoen ziklo-zenbakia), fabrikatzailearen argibideen arabera.
