-
Hotzean prentsatutako jojoba olio organikoa jojoba hazien olioa larruazala zaintzeko masajeetarako
Jojoba olio naturalaren osagai nagusiak azido palmitikoa, azido eruzikoa, azido oleikoa eta azido gadoleikoa dira. Jojoba olioa E bitamina eta B bitamina konplexua bezalako bitamina ugari ditu.
Jojoba Landarearen argizaria likidoa urre kolorekoa da. Jojoba belar olioak intxaur usain bereizgarria du eta Zainketa Pertsonaleko produktuen gehigarri hobetsia da, hala nola kremak, makillajea, xanpua, etab. Jojoba sendabelar olioa zuzenean aplika daiteke Eguzki-erredurak, Psoriasia eta Aknearen aurrean. Jojoba olio hutsak ilearen hazkuntza ere sustatzen du.
-
Aromaterapia larruazala zaintzeko izpiliku organiko olio esentzial purua
Erauzketa edo prozesatzeko metodoa: lurrun destilatua
Destilazioa Erauzketa zatia:Lorea
Herrialdearen jatorria: Txina
Aplikazioa: difusa/aromaterapia/masajea
Iraupena: 3 urte
Zerbitzu pertsonalizatua: etiketa eta kutxa pertsonalizatuak edo zure eskakizun gisa
Ziurtagiria: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100% Magnoliae Officmalis Cortex Olio organiko natural hutsa Larruazala zaintzeko funtsezko olioa
Hou Po-ren lurrina berehala mingotsa eta zorrotza da, gero pixkanaka-pixkanaka gozotasun eta berotasun sakon eta almibarretan irekitzen da.
Hou Po-ren afinitatea Lurraren eta Metalaren elementuekin da, non berotasun mingotsak biziki jarduten duen Qi eta hezetasun lehorra jaisten. Ezaugarri hauek direla eta, Txinako medikuntzan erabiltzen da digestio-hodiko geldialdia eta metaketa arintzeko, baita birikak oztopatzen dituen flemmak direla eta eztula eta txistua arintzeko.
Magnolia Officinials Sichuan, Hubei eta Txinako beste probintzietako mendietan eta haranetan jatorria duen zuhaitz hostozabala da. Txinako medikuntza tradizionalean erabiltzen den azal oso aromatikoa apiriletik ekainera bitartean bildutako zurtoin, adar eta sustraietatik kentzen da. Azala lodi eta leuna, olioz astuna, kolore purpura du barne aldean, distira bezalako kristal batekin.
Praktikatzaileek Hou Po Qing Pi olio esentzialarekin konbinatzea kontuan izan dezakete metaketak hausteko nahasketetan goi-ohar gisa.
-
OEM Custom Package Macrocephalae Rhizoma olio naturala
Agente kimioterapeutiko eraginkor gisa, 5-fluorouracil (5-FU) oso aplikatzen da digestio-traktuko, buruko, lepoko, bularreko eta obulutegiko tumore gaiztoak tratatzeko. Eta 5-FU koloneko minbiziaren lehen lerroko sendagaia da klinikan. 5-FUren ekintza-mekanismoa tumore-zeluletan urazil azido nukleikoa timina azido nukleiko bihurtzea blokeatzea da, ondoren DNAren eta RNAren sintesian eta konponketan eragina izatea bere efektu zitotoxikoa lortzeko (Afzal et al., 2009; Ducreux et al. al., 2015; Longley et al., 2003). Hala ere, 5-FU-k kimioterapiak eragindako beherakoa (CID) ere sortzen du, paziente asko eragiten dituen kontrako erreakzio ohikoenetako bat (Filho et al., 2016). 5-FUrekin tratatutako pazienteetan beherakoaren intzidentzia %50-%80 artekoa izan zen, eta horrek kimioterapiaren aurrerapenari eta eraginkortasunari larriki eragin zion (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Ondorioz, garrantzi handia du 5-FU eragindako CIDrako terapia eraginkorra aurkitzea.
Gaur egun, drogak ez diren esku-hartzeak eta farmakoen esku-hartzeak inportatu dira CIDaren tratamendu klinikoan. Drogak ez diren esku-hartzeek arrazoizko dieta eta gatz, azukre eta beste mantenugai batzuekin osagarriak dira. Loperamida eta octreotide bezalako sendagaiak normalean erabiltzen dira CIDren beherakoaren aurkako terapian (Benson et al., 2004). Horrez gain, etnomedikuntzak ere hartzen dira CID tratatzeko beren terapia bereziarekin hainbat herrialdetan. Txinako medikuntza tradizionala (TCM) etnomedikuntza tipiko bat da, eta 2000 urte baino gehiago daramatza Asia Ekialdeko herrialdeetan Txina, Japonia eta Korea barne (Qi et al., 2010). TCM-k dio kimioterapikoek Qi kontsumoa, barearen gabezia, urdaileko desharmonia eta hezetasun endofitikoa eragingo lituzketela, hesteetako eroaleen disfuntzioa eraginez. TCM teoriaren arabera, CIDren tratamendu-estrategia Qi osagarriaren eta spleen indartzearen araberakoa izan behar da batez ere (Wang et al., 1994).
Sustrai lehorrakAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) etaPanax ginsengCA Mey. (PG) TCM-ko belar sendagai tipikoak dira Qi osagarriaren eta spleen indartzearen efektu berdinekin (Li et al., 2014). AM eta PG belar bikote gisa erabiltzen dira (txinatar belar-bateragarritasunaren forma sinpleena) Qi-a osatzeko eta beherakoa tratatzeko barea sendotzeko efektuekin. Adibidez, AM eta PG beherakoaren aurkako formula klasikoetan dokumentatu ziren, hala nola Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang-en.Taiping Huimin Heji Ju Fang(Song dinastia, Txina) eta Bu Zhong Yi Qi TangPi Wei Lun(Yuan dinastia, Txina) (1. irudia). Aurreko hainbat ikerketek jakinarazi zuten hiru formulek CID arintzeko gaitasuna dutela (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Gainera, gure aurreko ikerketak erakutsi zuen AM eta PG bakarrik dituen Shenzhu kapsulak beherakoa, kolitisa (xiexie sindromea) eta beste gaixotasun gastrointestinal batzuen tratamenduetan eragin potentzialak dituela (Feng et al., 2018). Hala ere, ikerketak ez du eztabaidatu AM eta PGren eragina eta mekanismoa CID tratatzeko, konbinatuta edo bakarrik.
Orain hesteetako mikrobiota TCMren mekanismo terapeutikoa ulertzeko faktore potentziala dela uste da (Feng et al., 2019). Ikerketa modernoek adierazten dute hesteetako mikrobiotak paper erabakigarria duela hesteetako homeostasia mantentzeko. Hesteetako mikrobiota osasuntsuak hesteetako mukosaren babesean, metabolismoan, homeostasi eta erantzun immunologikoan eta patogenoen kentzean laguntzen du (Thursby eta Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Hesteetako mikrobiota desordenatuak giza gorputzaren funtzio fisiologikoak eta immunologikoak kaltetzen ditu zuzenean edo zeharka, beherakoa bezalako bigarren mailako erreakzioak eraginez (Patel et al., 2016; Zhao eta Shen, 2010). Ikerketek erakutsi zuten 5-FU-k hesteetako mikrobiotaren egitura nabarmen aldatu zuela sagu beherakoetan (Li et al., 2017). Hori dela eta, AM eta PM-ek 5-FUk eragindako beherakoetan eragin ditzakete hesteetako mikrobiotaren bitartez. Hala ere, oraindik ez da ezagutzen AM eta PG bakarrik eta konbinatuta 5-FU eragindako beherakoa saihestu dezaketen hesteetako mikrobiota modulatuz.
Beherakoaren aurkako efektuak eta AM eta PGren azpiko mekanismoa ikertzeko, 5-FU erabili dugu saguetan beherako eredu bat simulatzeko. Hemen, administrazio bakarraren eta konbinatuaren (AP) eragin potentzialetan zentratu ginenAtractylodes macrocephalaolio esentziala (AMO) etaPanax ginsengsaponin totalak (PGS), AM eta PGtik hurrenez hurren ateratako osagai aktiboak, beherakoa, hesteetako patologia eta mikrobio-egitura 5-FU kimioterapiaren ondoren.
-
100% Eucommiae Foliuml Olio natural hutsa Larruazala zaintzeko funtsezko olioa
Eucommia ulmoides(EB) (txineraz "Du Zhong" deitzen zaio normalean) Eucommiaceae familiakoa da, Txina erdialdeko zuhaitz txikiaren generoa [1]. Landare hau Txinan oso lantzen da eskala handian, duen garrantzia sendagarria dela eta. EBtik 112 konposatu inguru isolatu dira, besteak beste, lignanoak, iridoideak, fenolikoak, esteroideak eta beste konposatu batzuk. Landare honen belar osagarrien formulak (adibidez, te goxoa) propietate sendagarriak erakutsi ditu. EBko hostoak aktibitate handiagoa du kortexarekin, lorearekin eta fruituarekin lotuta [2,3]. EBko hostoek hezurren indarra eta gorputzeko muskuluak hobetzen dituztela jakinarazi dute.4], horrela iraupena ekarriz eta ugalkortasuna sustatzen du gizakietan [5]. EBko hostoarekin egindako te formula goxoak koipetasuna murrizten duela eta metabolismo energetikoa hobetzen duela jakinarazi zen. Konposatu flavonoideek (adibidez, errutina, azido klorogenikoa, azido ferulikoa eta azido kafeikoa) EBko hostoetan antioxidatzaile-jarduera erakusten dute.6].
EBren propietate fitokimikoei buruzko literatura nahikoa egon bada ere, EBko azal, hazi, zurtoin eta hostoetatik ateratako konposatu ezberdinen propietate farmakologikoei buruzko ikerketa gutxi zeuden. Berrikuspen-paper honek EBko atal ezberdinetatik (azala, haziak, zurtoina eta hostoa) ateratako konposatu ezberdinei buruzko informazio zehatza eta konposatu horien erabilera prospektiboak osasuna sustatzeko propietateetan froga zientifikoekin argituko du eta, horrela, erreferentziazko material bat emango du. EBren aplikaziorako.
-
Houttuynia cordata olio natural hutsa Houttuynia cordata olioa Lchthammolum olioa
Garapen bidean dauden herrialde gehienetan, biztanleriaren % 70-95 sendagai tradizionaletan oinarritzen da lehen mailako osasun-laguntzarako, eta pertsonen % 85ak landareak edo haien extractak erabiltzen ditu substantzia aktibo gisa.[1] Landareetatik biologikoki aktibo diren konposatu berrien bilaketa tokiko profesionalengandik lortutako informazio etniko eta folkloriko espezifikoaren araberakoa izan ohi da eta oraindik ere drogak aurkitzeko iturri garrantzitsutzat hartzen da. Indian, 2000 sendagai inguru landare jatorrikoak dira.[2] Sendabelarrak erabiltzeko interes zabala dela eta, oraingo berrikuspena onHouttuynia cordataThunb. literaturan agertzen diren ikerketa botaniko, komertzial, etnofarmakologiko, fitokimiko eta farmakologikoei buruzko informazio eguneratua eskaintzen du.H. cordataThunb. familiarena daSaururaceaeeta txinatar sugandila buztana bezala ezagutzen da normalean. Bi kimotipo desberdin dituen errizoma estoloniferoa duen belar iraunkor bat da.3,4] Espeziearen kimiotipo txinatarra apiriletik irailera Indiako ipar-ekialdean egoera basati eta erdi basatietan aurkitzen da.[5,6,7]H. cordataIndian dago eskuragarri, batez ere Assam-eko Brahmaputra haranean eta Assam-eko hainbat tribuk erabiltzen dute barazki moduan, baita sendagai ezberdinetan ere.
-
100% PureArctium lappa olioaren fabrikatzailea - Kare naturala Arctium lappa olioa kalitatea bermatzeko ziurtagiriekin
Osasun Onurak
Burdock erroa askotan jaten da, baina lehortu eta tean ere sartu daiteke. Ondo funtzionatzen du inulina iturri gisa, aprebiotikoadigestioa laguntzen eta hesteetako osasuna hobetzen duen zuntza. Gainera, erro honek flavonoideak (landareen mantenugaiak) ditu,fitokimikoak, eta osasunerako onurak dituztela ezagutzen diren antioxidatzaileak.
Gainera, burdock erroak beste onura batzuk eman ditzake:
Murriztu Hantura Kronikoa Burdock erroak antioxidatzaile ugari ditu, hala nola quercetina, azido fenolikoak eta luteolina, zure zelulak babesten lagun dezaketenak.erradikal askeak. Antioxidatzaile hauek gorputz osoko hantura murrizten laguntzen dute.
Osasun-arriskuak
Burdock erroa te gisa jateko edo edateko segurutzat jotzen da. Hala ere, landare honek beladonna gaueko beladon landareen antza handia du, toxikoak direnak. Gomendagarria da saltzaile fidagarriei burdock erroa erostea eta zure kabuz biltzeari uko egitea. Horrez gain, haurrengan edo haurdun dauden emakumeen eraginei buruzko informazio gutxi dago. Hitz egin zure medikuarekin umeekin burdock erroa erabili aurretik edo haurdun bazaude.
Hona hemen burdock erroa erabiltzen baduzu kontuan hartu beharreko osasun-arrisku posible batzuk:
Deshidratazioa areagotu
Burdock sustraiak diuretiko natural bat bezala jokatzen du, eta horrek deshidratazioa eragin dezake. Ur pilulak edo bestelako diuretikoak hartzen badituzu, ez duzu burdock errorik hartu behar. Botika hauek hartzen badituzu, garrantzitsua da deshidratazioa ekar dezaketen beste sendagai, belar eta osagai batzuen berri izatea.
Erreakzio alergikoa
Margari, ragweed edo krisantemoekiko sentikorra bazara edo erreakzio alergikoen historia baduzu, burdock sustraiarekiko erreakzio alergikoa izateko arrisku handiagoa duzu.
-
Handizkako prezioa 100% Pure AsariRadix Et Rhizoma olio Erlaxatu Aromaterapia Eucalyptus globulus
Animalien eta in vitro ikerketek sasafrasek eta bere osagaiek izan ditzaketen efektu antifungiko, antiinflamatorio eta kardiobaskularrak ikertu dituzte. Hala ere, saiakuntza klinikoak falta dira, eta sasafras ez da segurua erabiltzeko. Safrola, sasafras erroaren azalaren eta olioaren osagai nagusia, AEBko Elikagaien eta Droga Administrazioak (FDA) debekatu du, aroma edo usain gisa erabiltzeko barne, eta ez da barrutik edo kanpotik erabili behar, potentzialki kartzinogenoa baita. Safrola 3,4-metileno-dioximetanfetamina (MDMA) legez kanpoko ekoizpenean erabili izan da, "estasy" edo "Molly" kale izenez ere ezaguna, eta safrolaren eta sasafras olioaren salmenta AEBetako Drogen Indarkeriaren Administrazioak kontrolatzen du.
-
Handizkako prezioa 100% Stellariae Radix ezinbesteko olio hutsa (berria) Erlaxatu Aromaterapia Eucalyptus globulus
Txinako Farmakopeak (2020ko edizioa) eskatzen du YCH-ren metanol-estraktua ez dela % 20,0 baino txikiagoa izan behar.2], kalitatea ebaluatzeko beste adierazlerik zehaztu gabe. Ikerketa honen emaitzek erakusten dute lagin basatietako eta landutako metanol-estraktuen edukiak farmakopea estandarra betetzen zuela, eta ez zegoen alde nabarmenik haien artean. Hori dela eta, ez zegoen ageriko kalitate-desberdintasunik lagin basati eta landuen artean, indize horren arabera. Hala ere, lagin basatietako esterolen eta flavonoide totalen edukiak landutako laginetakoak baino nabarmen handiagoak ziren. Azterketa metabolomiko gehiagok lagin basati eta landuen artean metabolito aniztasun ugari agerian utzi zuen. Gainera, 97 metabolito nabarmen bereizi ziren, eta horiek zerrendan daudeS2 taula osagarria. Nabarmen desberdinak diren metabolito horien artean β-sitosterol (ID M397T42 da) eta quercetina deribatuak (M447T204_2) daude, zeinak osagai aktibo direla jakinarazi duten. Aurretik jakinarazi gabeko osagaiak, hala nola, trigonelina (M138T291_2), betaina (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenona (M241T189), arctiina (M557T165) eta azido loganikoa (M399T284_2) metabolito diferentzialak ere sartu ziren. Osagai hauek hainbat eginkizun betetzen dituzte antioxidazioaren, antiinflamatorioaren, erradikal askeen kentzeko, minbiziaren aurkako eta aterosklerosia tratatzeko eta, beraz, osagai aktibo berriak izan daitezke YCHn. Osagai aktiboen edukiak sendagaien eraginkortasuna eta kalitatea zehazten ditu [7]. Laburbilduz, metanol-estraktuak YCH kalitatearen ebaluazio-indize bakarra gisa muga batzuk ditu, eta kalitate-markatzaile zehatzagoak gehiago aztertu behar dira. Desberdintasun handiak zeuden esterol totaletan, flavonoide totaletan eta beste metabolito diferentzial askoren edukietan YCH basatiaren eta landuaren artean; beraz, haien artean kalitate-desberdintasun batzuk egon daitezke. Aldi berean, YCH-n aurkitu berri diren osagai aktibo potentzialek erreferentzia-balio garrantzitsua izan dezakete YCH-ren oinarri funtzionalak aztertzeko eta YCH baliabideak garatzeko.
Benetako material sendagarrien garrantzia aspalditik aitortua da jatorrizko eskualde zehatzean kalitate bikaineko txinatar sendagaiak ekoizteko.8]. Kalitate handia benetako sendagai-materialen funtsezko ezaugarria da, eta habitata material horien kalitatean eragiten duen faktore garrantzitsua da. YCH sendagai gisa erabiltzen hasi zenetik, YCH basatia izan da nagusi. 1980ko hamarkadan Ningxia-n YCH-ren sarrera eta etxekotzea arrakastatsuaren ondoren, Yinchaihu sendagaien iturria pixkanaka-pixkanaka basatitik YCH landura aldatu zen. YCH iturrien aurreko ikerketa baten arabera [9] eta gure ikerketa taldearen eremuko ikerketak, desberdintasun handiak daude landutako eta basatietako sendagaien banaketa-eremuetan. YCH basatia Shaanxi probintziako Ningxia Hui Eskualde Autonomoan banatzen da batez ere, Barne Mongoliako eta Ningxia erdialdeko zona lehorraren ondoan. Bereziki, eremu horietako basamortuko estepa da YCH hazteko habitat egokiena. Aitzitik, landatutako YCH-a basa banaketa eremuaren hegoaldean banatzen da batez ere, hala nola Tongxin konderria (Landua I) eta bere inguruko eremuak, Txinako laborantza eta ekoizpen oinarri handiena bihurtu dena, eta Pengyang konderria (Landua II). , hegoaldeagoa den eremu batean dagoena eta YCH landuaren beste ekoizle bat dena. Gainera, goiko bi landatutako eremuetako habitatak ez dira basamortuko estepa. Horregatik, ekoizpen moduaz gain, YCH basatiaren eta landuaren habitatean ere alde nabarmenak daude. Habitata faktore garrantzitsua da sendabelar-materialen kalitatean eragiten duena. Habitat ezberdinek landareetan bigarren mailako metabolitoen eraketa eta metaketa eragingo dute, eta, ondorioz, sendagaien kalitatea eragingo dute [10,11]. Hori dela eta, flavonoide osoen eta esterolen guztizko edukien desberdintasun esanguratsuak eta ikerketa honetan aurkitu ditugun 53 metabolitoen adierazpenak eremuaren kudeaketaren eta habitaten desberdintasunen ondorio izan daitezke.Ingurugiroak sendagaien kalitatean eragiten duen modu nagusietako bat jatorriko landareetan estresa egitea da. Ingurumeneko estres moderatuak metabolito sekundarioen metaketa suspertu ohi du.12,13]. Hazkunde/bereizkuntza balantzearen hipotesiak dio nutrienteak nahikoa hornitzen direnean landareak batez ere hazten direla, eta mantenugaiak eskasak direnean, landareek batez ere metabolito sekundario gehiago bereizten eta sortzen dituzte.14]. Ur gabeziak eragindako lehorte-estresa da eremu lehorreko landareek jasaten duten ingurumen-estres nagusia. Azterketa honetan, landutako YCHaren ur-egoera ugariagoa da, urteko prezipitazio-maila basatiarena baino nabarmen altuagoa izanik (Landutako I-ren ur-hornidura Basakoa baino 2 aldiz handiagoa zen; Landua II Basatuarena baino 3,5 aldiz handiagoa izan zen). ). Gainera, ingurune basatian lurzorua hareatsua da, baina laborantza lurzorua buztinezkoa da. Buztinarekin alderatuta, lur hondartsuak ura atxikitzeko gaitasun eskasa du eta litekeena da lehortearen estresa areagotzea. Aldi berean, laborantza prozesua maiz ureztatu egiten zen, beraz, lehortearen estres maila baxua zen. YCH basatia habitat idor natural gogorretan hazten da, eta, beraz, lehorte-estres larriagoa jasan dezake.Osmoerregulazioa mekanismo fisiologiko garrantzitsu bat da, landareek lehortearen estresari aurre egiteko, eta alkaloideak erregulatzaile osmotiko garrantzitsuak dira goi-landareetan.15]. Betainak uretan disolbagarriak diren alkaloide amonio kuaternarioko konposatuak dira eta osmoprotektore gisa jarduten dute. Lehorte-estresak zelulen potentzial osmotikoa murrizten du, osmoprotektoreek makromolekula biologikoen egitura eta osotasuna mantentzen eta mantentzen dituzten bitartean, eta lehorte-estresak landareei eragindako kalteak arintzen dituzte.16]. Esaterako, lehortearen estresaren ondorioz, azukre erremolatxaren eta Lycium barbarumen betaina edukia nabarmen handitu zen.17,18]. Trigonelina zelulen hazkuntzaren erregulatzailea da, eta lehortearen estresaren pean, landare-zelulen zikloaren iraupena luza dezake, zelulen hazkuntza eragotzi eta zelulen bolumena txikitzea ekar dezake. Zelulan solutuen kontzentrazioa handitzeak landareari erregulazio osmotikoa lortzeko eta lehortearen estresari aurre egiteko gaitasuna areagotzen du.19]. JIA X [20] aurkitu zuten, lehortearen estresaren areagotzearekin batera, Astragalus membranaceus-ek (Txinako medikuntza tradizionalaren iturria) trigonelina gehiago ekoizten zuela, potentzial osmotikoa erregulatzeko eta lehortearen estresari aurre egiteko gaitasuna hobetzeko. Flavonoideek ere paper garrantzitsua betetzen dute landareen lehortearen estresaren aurkako erresistentzian.21,22]. Ikerketa ugarik baieztatu dute lehortearen estres moderatua flavonoideak metatzeko lagungarria zela. Lang Duo-Yong et al. [23] lehorte-estresak YCHn dituen ondorioak alderatu zituen eremuan ura atxikitzeko ahalmena kontrolatuz. Lehorte-estresak sustraien hazkuntza inhibitzen zuela neurri batean, baina lehorte-estres moderatua eta larrian (% 40 eremuko ura eusteko ahalmena), YCH-n flavonoideen eduki osoa handitu egin zen. Bien bitartean, lehortearen estresaren pean, fitoesterolek zelulen mintzaren jariakortasuna eta iragazkortasuna erregulatzeko, ur-galera eragozteko eta estresaren erresistentzia hobetzeko jarduteko aukera dute.24,25]. Hori dela eta, YCH basatian flavonoide, esterolen, betaina, trigonelina eta beste metabolito sekundario batzuen metaketa areagotzea intentsitate handiko lehorte estresarekin erlazionatuta egon liteke.Ikerketa honetan, KEGG bidearen aberaste-analisia egin zen YCH basatiaren eta landuaren artean nabarmen desberdinak zirela aurkitu zuten metabolitoetan. Aberastutako metabolitoen artean askorbato eta aldaratoaren metabolismoaren, aminoazil-tRNAren biosintesiaren, histidinaren metabolismoaren eta beta-alaninaren metabolismoan parte hartzen zuten. Bide metaboliko hauek landareen estresarekiko erresistentzia mekanismoekin estu lotuta daude. Horien artean, askorbatoaren metabolismoak paper garrantzitsua betetzen du landareen antioxidatzaileen ekoizpenean, karbono eta nitrogenoaren metabolismoan, estresarekiko erresistentzian eta beste funtzio fisiologiko batzuetan.26]; aminoazil-tRNA biosintesia proteina eratzeko bide garrantzitsua da [27,28], estresari erresistenteak diren proteinen sintesian parte hartzen duena. Bi histidina eta β-alanina bideek landareen ingurumen-estresarekiko tolerantzia hobetu dezakete.29,30]. Horrek, gainera, adierazten du YCH basatiaren eta landuaren arteko metabolitoen desberdintasunak estresarekiko erresistentzia prozesuekin lotura estua zuela.Lurzorua sendabelarrak hazteko eta garatzeko oinarri materiala da. Lurzoruko nitrogenoa (N), fosforoa (P) eta potasioa (K) landareak hazteko eta garatzeko elikagai-elementu garrantzitsuak dira. Lurzoruko materia organikoak N, P, K, Zn, Ca, Mg eta sendabelarentzako beharrezkoak diren beste makroelementu eta oligoelementu batzuk ere baditu. Mantenugai gehiegi edo eskasak edo nutrienteen proportzio desorekatuak hazkuntzan eta garapenean eta sendagaien kalitatean eragingo dute, eta landare ezberdinek nutriente-behar desberdinak dituzte [31,32,33]. Esaterako, N estres baxuak Isatis indigotica-n alkaloideen sintesia sustatu zuen, eta onuragarria izan zen Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge eta Dichondra repens Forst bezalako landareetan flavonoideak metatzeko. Aitzitik, N gehiegik flavonoideen metaketa inhibitu zuen Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis eta Ginkgo biloba bezalako espezieetan, eta sendagaien kalitatea eragin zuen.34]. P ongarriaren aplikazioa eraginkorra izan zen Ural erregalizaren azido glizirrizikoaren eta dihidroacetonaren edukia handitzeko.35]. Aplikazio-kopuruak 0·12 kg·m−2 gainditzen zituenean, Tussilago farfara-ko flavonoideen eduki osoa gutxitu egin zen [36]. P ongarri bat aplikatzeak eragin negatiboa izan zuen Txinako medikuntza tradizionaleko rhizoma polygonati-n polisakaridoen edukian [37], baina K ongarri bat eraginkorra izan zen bere saponin edukia handitzeko [38]. 450 kg·hm−2 K ongarri aplikatzea izan zen bi urteko Panax notoginseng hazteko eta saponina metatzeko onena.39]. N:P:K = 2:2:1 proportzioan, extract hidrotermal, harpagida eta harpagoside kopuru totalak handienak izan ziren.40]. N, P eta K proportzio altua onuragarria izan zen Pogostemon cablin-en hazkundea sustatzeko eta olio lurrunkorren edukia handitzeko. N, P eta K proportzio baxuak Pogostemon cablin hosto-olioaren osagai eraginkor nagusien edukia handitu zuen [41]. YCH lurzoruari eusten dion landare bat da, eta N, P eta K bezalako mantenugaietarako eskakizun espezifikoak izan ditzake. Ikerketa honetan, landatutako YCHarekin alderatuta, YCH landare basatien lurzorua nahiko antzua zen: lurzoruaren edukia. materia organikoaren, N totala, P totala eta K totala landutako landareen 1/10, 1/2, 1/3 eta 1/3 inguru ziren, hurrenez hurren. Hori dela eta, lurzoruko mantenugaien desberdintasunak YCH landuan eta basatian atzemandako metabolitoen arteko desberdintasunen beste arrazoi bat izan daiteke. Weibao Ma et al. [42] aurkitu zuten N ongarri eta P ongarri kopuru jakin bat aplikatzeak hazien errendimendua eta kalitatea nabarmen hobetu zituela. Hala ere, nutriente-elementuek YCHren kalitatean duten eragina ez dago argi, eta sendagaien kalitatea hobetzeko ernalketa-neurriak gehiago aztertu behar dira.Txinako belar sendagaiek honako ezaugarriak dituzte: "Habitate onak errendimendua sustatzen dute eta habitat desegokiek kalitatea hobetzen dute" [43]. YCH basatitik landurako pixkanaka-pixkanaka aldatzeko prozesuan, landareen habitata basamortuko estepa lehor eta antzutik ur ugariagoko nekazaritza lur emankor izatera igaro zen. Landatutako YCH-aren habitata handiagoa da eta etekina handiagoa da, eta hori lagungarria da merkatuaren eskaerari erantzuteko. Hala ere, goi-habitat horrek aldaketa handiak ekarri zituen YCH-ren metabolitoetan; hau YCHaren kalitatea hobetzeko eta zientzian oinarritutako laborantza neurrien bidez YCH kalitate handiko ekoizpena nola lortu ala ez, ikerketa gehiago beharko dira.Habitat-hazkuntza simulatiboa sendabelar basatien habitata eta ingurumen-baldintzak simulatzeko metodo bat da, landareak epe luzera inguruneko estres espezifikoetara egokitzeko ezagutzan oinarrituta.43]. Basa-landareei eragiten dieten hainbat ingurumen-faktore simulatuz, batez ere benetako sendabelarren iturri gisa erabiltzen diren landareen jatorrizko habitata, ikuspegiak diseinu zientifikoa eta giza esku-hartze berritzailea erabiltzen ditu Txinako sendabelarren hazkundea eta bigarren mailako metabolismoa orekatzeko.43]. Metodoak kalitate handiko sendagai-materialak garatzeko antolamendu optimoak lortzea du helburu. Habitat simulatiboen hazkuntzak YCH-aren kalitate handiko ekoizpenerako modu eraginkorra eman behar du, nahiz eta oinarri farmakodinamikoak, kalitate-markatzaileak eta ingurumen-faktoreei erantzuteko mekanismoak argi ez dauden. Horren arabera, YCHaren laborantzan eta ekoizpenean diseinu zientifikoa eta eremua kudeatzeko neurriak YCH basatiaren ingurumen-ezaugarriei erreferentzia eginez egin behar direla iradokitzen dugu, hala nola lurzoru lehor, antzu eta hareatsuak. Aldi berean, ikertzaileek YCH-ren material funtzionalaren oinarriei eta kalitate-markatzaileei buruzko ikerketa sakonagoa egitea espero da. Azterketa horiek ebaluazio-irizpide eraginkorragoak eman ditzakete YCHrako, eta industriaren kalitate handiko ekoizpena eta garapen iraunkorra sustatu. -
Belar Fructus Amomi olioa Masaje naturala difusoreak 1kg Soltean Amomum villosum olio esentziala
Zingiberaceae familiak gero eta arreta handiagoa erakarri du ikerketa alelopatikoan, olio lurrunkor aberatsengatik eta espezie kideen aromatikotasunagatik. Aurreko ikerketek erakutsi zuten Curcuma zedoaria (zedoary) produktu kimikoek [40], Alpinia zerumbet (Perts.) BLBurtt & RMSm. [41] eta Zingiber officinale Rosc. [42] jengibrearen familiako efektu alelopatikoak dituzte artoaren, letxugaren eta tomatearen hazien ernekuntzan eta hazkuntzan. Gure oraingo ikerketa A. villosum (Zingiberaceae familiako kidea) zurtoin, hosto eta fruitu gazteen lurrunkorren jarduera alelopatikoaren lehen txostena da. Zurtoin, hosto eta fruitu gazteen olio-etekina %0,15, %0,40 eta %0,50 izan zen, hurrenez hurren, fruituek zurtoinek eta hostoek baino olio lurrunkor kantitate handiagoa sortzen zutela adierazten du. Zurtoinetako olio lurrunkorren osagai nagusiak β-pinenoa, β-felandrenoa eta α-pinenoa ziren, hosto-olioaren produktu kimiko nagusienaren antzeko eredua zen, β-pinenoa eta α-pinenoa (hidrokarburo monoterpenikoak). Bestalde, fruitu gazteetako olioa bornil azetatoan eta kanforan (monoterpeno oxigenatuetan) aberatsa zen. Emaitzak Do N Dai-ren aurkikuntzek babestu zituzten [30,32] eta Hui Ao [31] A. villosum-en organo ezberdinetako olioak identifikatu zituena.
Konposatu nagusi horien landare-hazkundearen inhibizio-jarduerei buruzko hainbat txosten egin dira beste espezie batzuetan. Shalinder Kaur-ek aurkitu zuen eukaliptoko α-pinenoak Amaranthus viridis L.ren sustraiaren luzera eta kimuaren altuera nabarmen zapaltzen zituela 1,0 μL-ko kontzentrazioan.43], eta beste ikerketa batek erakutsi zuen α-pinenoak sustraiaren hazkuntza goiztiarra inhibitzen zuela eta sustrai-ehunetan kalte oxidatiboa eragiten zuela oxigeno-espezie erreaktiboen sorreraren bidez [44]. Txosten batzuek argudiatu dute β-pinenoak probako belar txarrak ernetzea eta landareen hazkuntza inhibitu zituela dosiaren araberako erantzunean, mintzaren osotasuna apurtuz.45], landareen biokimika aldatuz eta peroxidasen eta polifenol oxidasen jarduerak hobetuz [46]. β-Phellandreneak inhibizio maximoa erakutsi zuen Vigna unguiculata (L.) Walp-en ernetzearen eta hazteko 600 ppm-ko kontzentrazioan [47], berriz, 250 mg/m3-ko kontzentrazioan, kanforak Lepidium sativum L.-ren erradikula eta kimuen hazkuntza kendu zuen.48]. Hala ere, bornil azetatoaren efektu alelopatikoaren berri ematen duten ikerketak eskasak dira. Gure ikerketan, β-pinenoaren, bornil azetatoaren eta kanforaren efektu alelopatikoak sustraiaren luzeran olio lurrunkorrenak baino ahulagoak izan ziren α-pinenoan izan ezik, hosto-olioa, α-pinenoan aberatsa, dagokion lurrunkorra baino fitotoxikoagoa zen. A. villosum-en zurtoin eta fruituetako olioak, bi aurkikuntzak α-pinenoa espezie honen alelopatiarako produktu kimiko garrantzitsua izan daitekeela adierazten dute. Aldi berean, emaitzek ere inplikatu zuten fruitu-olioan ugariak ez ziren konposatu batzuek efektu fitotoxikoa sortzen lagun dezaketela, etorkizunean ikerketa gehiago behar duen aurkikuntza.Baldintza normaletan, alelokimikoen efektu alelopatikoa espeziearen espezifikoa da. Jiang et al. aurkitu zuen Artemisia sieversiana-k ekoitzitako olio esentzialak eragin indartsuagoa zuela Amaranthus retroflexus L.-n Medicago sativa L., Poa annua L. eta Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng-en baino. [49]. Beste ikerketa batean, Lavandula angustifolia Errotako olio lurrunkorra. efektu fitotoxiko maila desberdinak sortu zituen landare-espezie desberdinetan. Lolium multiflorum Lam. espezie hartzailerik sentikorrena izan zen, hipokotiloaren eta erradikularen hazkundea % 87,8 eta % 76,7an inhibitu zen, hurrenez hurren, 1 μL/ml olio dosiarekin, baina pepinoen plantulen hipokotiloaren hazkuntza ia ez zen eraginik izan.20]. Gure emaitzek ere erakutsi zuten L. sativa eta L. perenneren artean A. villosum volatilesekiko sentsibilitatean aldea zegoela.Espezie bereko konposatu lurrunkorrak eta olio esentzialak alda daitezke kuantitatiboki eta/edo kualitatiboki, hazkuntza-baldintzen, landareen zatien eta detektatzeko metodoen ondorioz. Esaterako, txosten batek frogatu zuen piranoidea (% 10,3) eta β-kariofilenoa (% 6,6) Sambucus nigraren hostoetatik igorritako lurrunkorren konposatu nagusiak zirela, benzaldehidoa (% 17,8), α-bulnesenoa (% 16,6) eta tetrakosanoa. (% 11,5) hostoetatik ateratako olioetan ugariak ziren [50]. Gure ikerketan, landare-material freskoek askatutako konposatu lurrunkorrek erauzitako olio lurrunkorrek baino efektu alelopatiko indartsuagoak izan zituzten saiakuntzako landareetan, erantzunaren aldeak bi prestakinetan dauden alelokimikoen desberdintasunekin oso lotuta zeuden. Konposatu lurrunkorren eta olioen arteko desberdintasun zehatzak gehiago ikertu behar dira ondorengo esperimentuetan.Olio lurrunkorrak gehitu zitzaizkien lurzoruko laginetan mikroorganismoen aniztasunaren eta komunitatearen egituraren arteko desberdintasunak mikroorganismoen arteko lehiarekin erlazionatuta zeuden, baita efektu toxikoekin eta lurzoruko olio lurrunkorren iraupenarekin ere. Vokou eta Liotiri [51] aurkitu zuten landutako lurzoruari (150 g) lau olio esentzialen (0,1 ml) aplikatzeak lurzoruaren laginen arnasketa aktibatu zuela, nahiz eta olioek konposizio kimikoan desberdinak izan, landare-olioak karbono- eta energia-iturri gisa erabiltzen direla iradokituz. lurzoruko mikroorganismoak. Oraingo ikerketatik lortutako datuek baieztatu zuten A. villosum landare osoko olioek lurzoruko onddoen espezieen kopurua nabarmen handitzen lagundu zutela olioa gehitu ondorengo 14. egunean, olioak karbono-iturri gehiagorako eman dezakeela adierazten duena. lurzoruko onddoak. Beste ikerketa batek aurkikuntza baten berri eman zuen: lurzoruko mikroorganismoek Thymbra capitata L. (Cav) olioa gehitzeak eragindako aldi baterako aldakuntza-aldi baten ondoren bere hasierako funtzioa eta biomasa berreskuratu zuten, baina olioa dosi altuenean (0,93 µL olioa lur gramo bakoitzeko) ez zien lurzoruko mikroorganismoei hasierako funtzionaltasuna berreskuratzen utzi [52]. Egungo azterketan, egun eta kontzentrazio ezberdinekin tratatu ondoren lurzoruaren analisi mikrobiologikoan oinarrituta, lurzoruko bakterio-komunitatea egun gehiagoren buruan berreskuratuko zela espekulatu genuen. Aitzitik, onddoen mikrobiota ezin da jatorrizko egoerara itzuli. Ondorengo emaitzek hipotesi hau berresten dute: olioaren kontzentrazio altuak lurzoruko onddoen mikrobiomaren osaeran duen eragin nabarmena koordenatu nagusien analisiak (PCoA) agerian utzi zuen, eta bero-mapen aurkezpenek berriro baieztatu zuten lurzoruaren onddoen komunitatearen konposizioa. 3,0 mg/mL olioarekin tratatua (hau da, 0,375 mg olio lur gramo bakoitzeko) genero mailan beste tratamenduetatik nabarmen desberdina zen. Gaur egun, hidrokarburo monoterpenoen edo monoterpeno oxigenatuen gehitzeak lurzoruko mikrobio-aniztasunean eta komunitate-egituran dituen ondorioei buruzko ikerketak urria dira oraindik. Ikerketa batzuek jakinarazi zuten α-pinenoak lurzoruko mikrobioen jarduera eta Methylophilaceae-en (metilotrofoen talde bat, Proteobacteria) ugaritasun erlatiboa areagotu zuela hezetasun-eduki baxuan, karbono-iturri gisa paper garrantzitsua betetzen zuela lurzoru lehorretan.53]. Era berean, A. villosum landare osoaren olio lurrunkorra, % 15,03 α-pineno duena (S1 taula osagarria), jakina, Proteobacterien ugaritasun erlatiboa handitu zuen 1,5 mg/mL eta 3,0 mg/mL-tan, eta horrek iradokitzen du α-pinenoa lurzoruko mikroorganismoen karbono-iturrietako bat izan daitekeela.A. villosum-en organo ezberdinek ekoitzitako konposatu lurrunkorrek hainbat efektu alelopatiko-maila izan zituzten L. sativa eta L. perenne-n, A. villosum landare-atalek zituzten osagai kimikoekin oso lotuta zegoen. Olio lurrunkorren konposizio kimikoa baieztatu bazen ere, A. villosum-ek giro-tenperaturan askatutako konposatu lurrunkorrak ezezagunak dira, eta ikerketa gehiago behar dute. Gainera, alelokimiko ezberdinen arteko efektu sinergikoa ere kontuan hartzekoa da. Lurzoruko mikroorganismoei dagokienez, olio lurrunkorrak lurzoruko mikroorganismoetan duen eragina modu zabalean aztertzeko, oraindik ikerketa sakonagoak egin behar ditugu: olio lurrunkorren tratamendu-denbora luzatu eta lurzoruko olio lurrunkorren konposizio kimikoan dauden aldaerak hautemateko. egun ezberdinetan. -
Artemisia capillaris olio purua kandelak eta xaboiak egiteko handizkako difusorerako ezinbesteko olioa lezka-erregailuetarako difusoreetarako
Karraskarien ereduaren diseinua
Animaliak ausaz banatu ziren hamabost saguz osatutako bost taldetan. Kontrol-taldea eta eredu-taldea saguekin gavage egin zensesamo olioa6 egunez. Kontrol positiboaren taldeko saguei bifendate pilulekin (BT, 10 mg/kg) 6 egunez eman zitzaien. Talde esperimentalak sesamo-olioan disolbatutako 100 mg/kg eta 50 mg/kg AEOrekin tratatu ziren 6 egunez. 6. egunean, kontrol-taldea sesamo-olioarekin tratatu zen, eta beste talde guztiak %0,2ko CCl4-ko dosi bakar batekin tratatu ziren sesamo-olioan (10 ml/kg).injekzio intraperitoneal. Ondoren, saguei urik gabe barau egin zieten, eta ontzi erretrobulbarreko odol-laginak jaso zituzten; bildutako odola 3000 ×-tan zentrifugatu zeng10 minutuz seruma bereizteko.Zerbikaleko luxazioaodola atera eta berehala egin zen, eta gibeleko laginak berehala kendu ziren. Gibeleko laginaren zati bat berehala gorde zen -20 °C-tan aztertu arte, eta beste zati bat kendu eta %10ean finkatu zen.formalinairtenbidea; gainerako ehunak -80 °C-tan gorde ziren azterketa histopatologikorako (Wang et al., 2008,Hsu et al., 2009,Nie et al., 2015).
Serumeko parametro biokimikoen neurketa
Gibeleko lesioa estimatuz ebaluatu zenjarduera entzimatikoakserum ALT eta AST dagozkien kit komertzialak erabiliz kitetarako argibideen arabera (Nanjing, Jiangsu probintzia, Txina). Jarduera entzimatikoak litroko (U/l) unitate gisa adierazi ziren.
MDA, SOD, GSH eta GSH-P neurketaxgibeleko homogeneoetan
Gibeleko ehunak gatz fisiologiko hotzarekin homogeneizatu ziren 1:9 proportzioan (w/v, gibela:salinoa). Homogeneizatuak zentrifugatu ziren (2500 ×g10 min) gainnatzaileak biltzeko ondorengo determinazioetarako. Gibeleko kaltea MDA eta GSH mailen eta SOD eta GSH-P neurketa hepatikoen arabera ebaluatu zen.xjarduerak. Horiek guztiak kitaren argibideei jarraituz zehaztu ziren (Nanjing, Jiangsu probintzia, Txina). MDA eta GSH-ren emaitzak mg proteina bakoitzeko nmol gisa adierazi ziren (nmol/mg prot), eta SOD eta GSH-P-ren jarduerak.xmg proteina bakoitzeko U gisa adierazi ziren (U/mg prot).
Analisi histopatologikoa
Lortutako gibel zatiak % 10eko buffer batean finkatu zirenparaformaldehidoafosfato disoluzioa. Ondoren, lagina parafinan txertatu zen, 3-5 μm-ko ataletan zatitu eta tindatu zen.hematoxilinaetaeosina(H&E) prozedura estandar baten arabera, eta, azkenik, aztertuargi mikroskopia(Tian et al., 2012).
Analisi estatistikoa
Emaitzak batez besteko ± desbideratze estandar gisa adierazi ziren. Emaitzak SPSS Statistics programa estatistikoa erabiliz aztertu dira, 19.0 bertsioa. Datuak bariantzaren analisia egin zuten (ANOVA,p< 0,05) ondoren, Dunnett-en proba eta Dunnett-en T3 proba, hainbat talde esperimentalen balioen arteko alde estatistiko esanguratsuak zehazteko. Alde esanguratsu bat kontuan hartu zen maila bateanp< 0,05.
Emaitzak eta eztabaida
AEOren osagaiak
GC/MS analisiaren ondoren, AEOak 10 eta 35 minutu bitarteko 25 osagai zituela aurkitu zen, eta olio esentzialaren % 84 osatzen zuten 21 osagai identifikatu ziren (1. taula). Daukan olio lurrunkorramonoterpenoideak(%80,9), sesquiterpenoideak (%9,5), hidrokarburo adargabe aseak (%4,86) eta askotariko azetilenoak (%4,86). Beste ikasketekin alderatuta (Guo et al., 2004), monoterpenoide ugari aurkitu ditugu (%80,90) AEOan. Emaitzek erakutsi zuten AEOren osagairik ugariena β-zitronelola (%16,23) dela. AEOaren beste osagai garrantzitsu batzuk 1,8-zineola (%13,9) dira,kanfora(%12,59),linalol(%11,33), α-pineno (%7,21), β-pineno (%3,99),timola(%3,22), etamirzenoa(%2,02). Konposizio kimikoaren aldakuntza landareak jasandako ingurumen-baldintzekin erlazionatuta egon daiteke, hala nola, ur mineralarekin, eguzki-argiarekin, garapen-fasearekin etaelikadura.
-
Saposhnikovia divaricata olio purua kandelak eta xaboiak egiteko handizkako difusorerako ezinbesteko olioa lezka-erregailuetarako difusoreetarako
2.1. SDE prestatzea
SD-ren errizomak Hanherb Co.-n (Guri, Korea) belar lehor gisa erosi ziren. Landare-materialak taxonomikoki baieztatu zituen Koreako Ekialdeko Medikuntza Institutuko (KIOM) Go-Ya Choi doktoreak. Bono-ale bat (2014 SDE-6 zenbakia) Belar Baliabide Estandarren Koreako Belartegian gorde zen. SD-ren errizoma lehorrak (320 g) bi aldiz erauzi ziren % 70eko etanolarekin (2 orduko errefluxuarekin) eta ateratakoa presio murriztuan kontzentratu zen. Dekokzioa iragazi, liofilizatu eta 4 °C-tan gordetzen da. Hasierako material gordinaren erauzkin lehorraren etekina %48,13koa izan zen (p/w).
2.2. Errendimendu handiko kromatografia likidoaren (HPLC) analisi kuantitatiboa
Analisi kromatografikoa HPLC sistema batekin (Waters Co., Milford, MA, AEB) eta fotodiodo array detektagailu batekin egin da. SDEren HPLC analisirako, lehen-O-glucosylcimifugin estandarra Medikuntza Tradizionalaren Industriarako Koreako Sustapen Institutuan erosi zen (Gyeongsan, Korea) etaseg-O-glucosylhamaudol eta 4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol gure laborategian isolatu eta analisi espektralen bidez identifikatu ziren, batez ere RMN eta MS bidez.
SDE laginak (0,1 mg) % 70eko etanolen (10 ml) disolbatu ziren. Bereizketa kromatografikoa XSelect HSS T3 C18 zutabe batekin egin zen (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, AEB). Fase mugikorra azetonitriloz (A) eta %0,1eko azido azetikoz osatuta zegoen uretan (B) 1,0 ml/min-ko emariarekin. Urrats anitzeko programa bat erabili zen honela: % 5 A (0 min), % 5-20 A (0-10 min), % 20 A (10-23 min) eta % 20-65 A (23-40 min). ). Detekzio-uhin-luzera 210-400 nm-ra eskaneatu eta 254 nm-ra grabatu zen. Injekzio bolumena 10,0 izan zenμL. Hiru kromonak zehazteko soluzio estandarrak 7,781 mg/mL-ko azken kontzentrazioan prestatu ziren (prim-O-glukosilzimifugina), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-metilbisaminol), eta 31,125 mg/mL (seg-O-glucosylhamaudol) metanolean eta 4°C-tan mantendu.
2.3. Hanturaren aurkako jardueraren ebaluazioaIn Vitro
2.3.1. Zelula-kultura eta Laginen Tratamendua
RAW 264.7 zelulak American Type Culture Collectiontik (ATCC, Manassas, VA, AEB) lortu ziren eta % 1 antibiotikoak eta % 5,5 FBS zituen DMEM medioan hazi ziren. Zelulak %5 CO2ko atmosfera heze batean inkubatu ziren 37°C-tan. Zelulak estimulatzeko, medioa DMEM euskarri fresko batekin ordezkatu zen, eta lipopolisakaridoarekin (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, AEB) 1ean.μg/mL gehitu zen SDEren presentzian edo ezean (200 edo 400μg/mL) 24 ordu gehiagoz.
2.3.2. Oxido nitrikoa (NO), prostaglandina E2 (PGE2), tumore-nekrosi faktorea-.α(TNF-α), eta Interleukina-6 (IL-6) Ekoizpena
Zelulak SDErekin tratatu eta LPSarekin estimulatu ziren 24 orduz. NO produkzioa aztertu zen, Griess erreaktiboa erabiliz nitritoa neurtuz, aurreko ikerketa baten arabera [12]. PGE2, TNF- hanturazko zitokinen jariapenaα, eta IL-6 ELISA kit (I+G sistemak) erabiliz zehaztu zen fabrikatzailearen argibideen arabera. SDEren ondorioak NO eta zitokinen ekoizpenean 540 nm edo 450 nm-n zehaztu ziren Wallac EnVision erabiliz.™mikroplaken irakurgailua (PerkinElmer).
2.4. Antiosteoartritisaren jardueraren ebaluazioaIn Vivo
2.4.1. Animaliak
Sprague-Dawley arratoi arrak (7 aste) Samtako Inc (Osan, Korea) erosi ziren eta 12 orduko argi/ilun zikloarekin baldintza kontrolatuetan kokatu ziren.°C eta% hezetasuna. Arratoiei laborategiko dieta eta ura eman zitzaienad libitum. Prozedura esperimental guztiak Osasun Institutu Nazionalak (NIH) jarraibideen arabera egin ziren eta Daejeon unibertsitateko Animalien Zainketa eta Erabilera Batzordeak (Daejeon, Koreako Errepublika) onartu zituen.
2.4.2. OAren indukzioa MIArekin Arratoietan
Animaliak ausazko banatu ziren eta tratamendu-taldeetara esleitu ziren azterketa hasi aurretik (talde bakoitzeko). MIA disoluzioa (3 mg/50μ% 0,9ko gatz-L) eskuin belauneko artikulazio barruko espazioan zuzenean injektatu zen ketamina eta xilazina nahasketa batekin eragindako anestesiapean. Arratoiak ausaz lau taldetan banatu ziren: (1) gatz-taldea MIA injekziorik gabe, (2) MIA taldea MIA injekzioarekin, (3) SDE tratatutako taldea (200 mg/kg) MIA injekzioarekin eta (4). ) indometazina- (IM-) tratatutako taldea (2 mg/kg) MIA injekzioarekin. Arratoiak ahoz administratu ziren SDE eta IM-ekin MIA injektatu baino astebete lehenago 4 astez. Ikerketa honetan erabilitako SDE eta IM dosia aurreko ikerketetan erabilitakoetan oinarritzen zen [10,13,14].
2.4.3. Hindpaw-aren pisuaren banaketaren neurketak
OA induzitu ondoren, atzeko hanken pisua jasateko gaitasunaren jatorrizko oreka eten egin zen. Ezintasun-probatzaile bat (Linton instrumentation, Norfolk, Erresuma Batua) erabili zen pisu-jasateko tolerantziaren aldaketak ebaluatzeko. Arratoiak kontu handiz sartu ziren neurketa-ganberan. Atzeko gorputz-adarrak jasaten duen pisuaren indarra 3 s-ko aldian batez bestekoa izan da. Pisuaren banaketa-erlazioa honako ekuazio honen bidez kalkulatu da: [pisua eskuineko atzeko adarrean/(pisua eskuineko atzeko gorputzean + pisua ezkerreko atzeko adarrean)] × 100 [15].
2.4.4. Serum Zitokinen Mailen Neurketak
Odol laginak 1.500 g-tan zentrifugatu ziren 10 minutuz 4°C-tan; ondoren, seruma bildu eta -70 °C-tan gorde zen erabili arte. IL-1 mailakβ, IL-6, TNF-α, eta serumeko PGE2 I+D Systems-en (Minneapolis, MN, AEB) ELISA kitak erabiliz neurtu ziren fabrikatzailearen argibideen arabera.
2.4.5. Denbora errealeko RT-PCR analisi kuantitatiboa
RNA osoa belauneko ehunetik atera zen TRI erreaktiboa erabiliz (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, AEB), alderantziz transkribatu zen cDNAn eta PCR bidez anplifikatu zen TM One Step RT PCR kit batekin SYBR berdearekin (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, AEB). Denbora errealeko PCR kuantitatiboa Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR sistema erabiliz egin da (Applied Biosystems, Grand Island, NY, AEB). Primer sekuentziak eta zunda-sekuentzia taulan agertzen dira1. Laginen cDNAren alikuotak eta GAPDH cDNA kopuru berdina anplifikatu ziren DNA polimerasa zuen TaqMan® Universal PCR nahasketa maisuarekin fabrikatzailearen argibideen arabera (Applied Biosystems, Foster, CA, AEB). PCR baldintzak 2 min 50 °C-tan, 10 min 94 °C-tan, 15 s 95 °C-tan eta 1 min 60 °C-tan 40 ziklotan izan dira. Xede-genearen kontzentrazioa Ct (atalasearen ziklo-zenbakia anplifikazio grafikoaren eta atalasearen arteko gurutze-puntuan) metodo konparatiboa erabiliz zehaztu zen, fabrikatzailearen argibideen arabera.
