Osteoartritisa (OA) 65 urtetik gorako biztanleriari eragiten dien hezur-artikulazio endekapenezko gaixotasun kronikoetako bat da.
1]. Orokorrean, OA gaixoek kartilago kaltetua, sinovioa hanturatua eta kondrozito higatuak dituztela diagnostikatzen dute, eta horrek mina eta estutasun fisikoa eragiten du.
2]. Mina artritikoa artikulazioetako kartilagoaren endekapenaren ondorioz sortzen da batez ere hanturak, eta kartilagoa larriki kaltetuta dagoenean hezurrek elkarren artean talka egin dezakete, mina jasanezina eta zailtasun fisikoak eraginez.
3]. Mina, hantura eta artikulazioaren zurruntasuna bezalako sintomekin hantura-bitartekarien parte-hartzea ondo dokumentatuta dago. OA gaixoetan, likido sinobialean kartilagoaren eta subkondralaren higadura eragiten duten hanturazko zitokinak aurkitzen dira.
4]. OA gaixoek orokorrean dituzten bi kexa nagusi mina eta sinovial hantura dira. Beraz, egungo OA terapien helburu nagusiak mina eta hantura murriztea dira. [
5]. Eskuragarri dauden OA tratamenduek, esteroideak ez diren sendagaiak eta esteroideak barne, mina eta hantura arintzeko eraginkortasuna frogatu badute ere, sendagai hauen epe luzerako erabilerak osasun-ondorio larriak ditu, hala nola disfuntzio kardiobaskularrak, gastrointestinalak eta giltzurrunak.
6]. Horrela, bigarren mailako efektu gutxiago dituen sendagai eraginkorragoa garatu behar da artrosiaren tratamendurako.
Osasun produktu naturalak gero eta ezagunagoak dira seguruak eta erraz eskuragarriak izateagatik [
7]. Koreako sendagai tradizionalek eraginkortasuna frogatu dute hainbat hanturazko gaixotasunen aurka, artritisa barne.
8]. Aucklandia lappa DC. propietate sendagarriengatik ezaguna da, hala nola, qi-aren zirkulazioa hobetzea mina arintzeko eta urdaila lasaitzeko, eta tradizionalki analgesiko natural gisa erabili izan da.
9]. Aurreko txostenek diote A. lappa-k hanturaren aurkakoa duela [
10,
11], analgesikoa [
12], minbiziaren aurkako [
13], eta gastrobabeslea [
14] efektuak. A. lapparen jarduera biologiko desberdinak bere konposatu aktibo nagusiek eragiten dituzte: costunolide, dehydrocostus lactone, dihidrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone eta costuslactone.
15]. Aurretik egindako ikerketek diote costunolidak lipopolisakaridoetan (LPS) antiinflamatorioak erakutsi zituela, makrofagoak induzitu baitzituen NF-kB eta bero-shock proteinaren bidearen bidez.
16,
17]. Hala ere, ez da ikerketarik egin A. lappa-k OA tratamendurako izan ditzakeen jarduerak ikertu. Oraingo ikerketak A. lappak OAren aurka dituen efektu terapeutikoak ikertu ditu (monosodio-iodoazetatoa) MIA eta azido azetikoak eragindako karraskarien ereduak erabiliz.
Monosodio-iodoacetatoa (MIA) animalietan minaren jokabide eta ezaugarri fisiopatofisiologiko asko sortzeko erabiltzen da.
18,
19,
20]. Belauneko artikulazioetan injektatzen denean, MIAk kondrozitoen metabolismoa nahasten du eta hantura eta hanturazko sintomak eragiten ditu, hala nola kartilagoak eta hezur subkondralen higadura, OAren sintoma kardinalak.
18]. Azido azetikoaren bidez eragindako zimur-erantzuna oso zabalduta dago hanturazko mina kuantitatiboki neurtu daitekeen animalietan mina periferikoaren simulazio gisa.
19]. Sagu makrofagoen zelula-lerroa, RAW264.7, hanturaren erantzun zelularrak aztertzeko erabiltzen da. LPSarekin aktibatzen direnean, RAW264 makrofagoek hanturazko bideak aktibatzen dituzte eta hainbat hanturazko bitartekari jariatzen dituzte, hala nola TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS eta IL-6.
20]. Azterketa honek A. lapparen OAren aurkako efektu antinozizeptiboak eta antiinflamatorioak ebaluatu ditu MIA animalia-ereduan, azido azetikoak eragindako animalia-ereduan eta LPS-ak aktibatutako RAW264.7 zeluletan.
2. Materialak eta Metodoak
2.1. Landare Materiala
A. lappa DC-ren sustrai lehorra. esperimentuan erabilitako Epulip Pharmaceutical Co., Ltd.-ri (Seul, Korea) eskuratu zen. Donghun Lee irakasleak, Belar farmakologiako departamentuak, Koreako Medikuntzako koronekoak, Gachon Unibertsitateak, identifikatu zuen eta bonoaren ale-zenbakia 18060301 gisa jarri zen.
2.2. HPLC A. lappa Extract-aren analisia
A. lappa errefluxu aparatu baten bidez atera zen (ur destilatua, 3 h 100 °C-tan). Erauzitako disoluzioa iragazi eta kondentsatu egin zen presio baxuko lurrungailu baten bidez. A. lappa estraktuak % 44,69ko etekina izan zuen -80 °C-tik behera liofilizatu ondoren. A. lapparen analisi kromatografikoa 1260 InfinityⅡ HPLC-sistema erabiliz konektatutako HPLC batekin egin zen (Agilent, Pal Alto, CA, AEB). Bereizketa kromatikoa egiteko, EclipseXDB C18 zutabea (4,6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) erabili zen 35 °C-tan. Guztira, laginaren 100 mg % 50eko metanolaren 10 mltan diluitu eta 10 minutuz sonikatu ziren. Laginak 0,45 μm-ko xiringa-iragazki batekin iragazi ziren (Waters Corp., Milford, MA, AEB). Fase mugikorreko konposizioa %0,1eko azido fosforikoa (A) eta azetonitriloa (B) zen eta zutabea honela eluatu zen: 0-60 min, %0; 60-65 min, %100; 65-67 min, %100; 67-72 min, % 0 disolbatzailea B 1,0 ml/min-ko emariarekin. Efluentea 210 nm-tan behatu zen 10 μL-ko injekzio-bolumena erabiliz. Analisia hirukoiztuta egin da.
2.3. Animalien Etxebizitza eta Kudeaketa
5 asteko Sprague-Dawley (SD) arratoi arrak eta 6 asteko ICR sagu arrak Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) erosi ziren. Animaliak gela batean mantendu ziren tenperatura konstantea (22 ± 2 °C) eta hezetasuna (% 55 ± 10) eta 12/12 orduko argi/ilun zikloa erabiliz. Animaliak esperimentua hasi baino astebete baino gehiagoz ezagutu zuten egoera. Animaliek ad libitum pentsu eta ur hornidura zuten. Gachon Unibertsitatean animaliak zaintzeko eta maneiatzeko egungo arau etikoak (GIACUC-R2019003) zorrotz bete ziren animalien esperimentazio-prozedura guztietan. Ikerketa ikertzaileak itsututa eta saiakuntza paraleloa diseinatu zen. Animalien Etika Esperimentaleko Batzordearen jarraibideen arabera eutanasia metodoa jarraitu dugu.
2.4. MIA injekzioa eta tratamendua
Arratoiak ausaz 4 taldetan banatu ziren, hau da, iruzurra, kontrola, indometazina eta A. lappa. % 2ko isofluorano O2 nahasketarekin anestesiatuta, arratoiak 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, AEB) barne-artikularrean injektatu zituzten belauneko artikulazioetan OA esperimentala ekartzeko. Tratamenduak jarraian bezala egin ziren: kontrol eta iruzur taldeak AIN-93G oinarrizko dietarekin soilik mantendu ziren. Bakarrik, indometazina taldeari indometazina (3 mg/kg) eman zitzaion AIN-93G dietan sartuta eta A. lappa 300 mg/kg taldeari A. lappa (300 mg/kg) osatutako AIN-93G dietan esleitu zitzaion. Tratamenduak 24 egunez jarraitu ziren OA indukzio egunetik 15-17 g-ko 190-210 g gorputz-pisu bakoitzeko egunero.
2.5. Pisua Jasaten Neurketa
OA induzitu ondoren, arratoien atzeko gorputz-adarretan pisu-jasateko ahalmena neurtu zen incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, AEB) aurreikusitako moduan. Atzeko gorputz-adarretan pisuaren banaketa kalkulatu da: pisua jasateko ahalmena (%)
