Saposhnikovia divaricata olio purua kandelak eta xaboiak egiteko handizkako difusorerako ezinbesteko olioa lezka-erregailuetarako difusoreetarako

deskribapen laburra:

2.1. SDE prestatzea

SD-ren errizomak Hanherb Co.-n (Guri, Korea) belar lehor gisa erosi ziren. Landare-materialak taxonomikoki baieztatu zituen Koreako Ekialdeko Medikuntza Institutuko (KIOM) Go-Ya Choi doktoreak. Bono-ale bat (2014 SDE-6 zenbakia) Belar Baliabide Estandarren Koreako Belartegian gorde zen. SD-ren errizoma lehorrak (320 g) bi aldiz erauzi ziren % 70eko etanolarekin (2 orduko errefluxuarekin) eta ateratakoa presio murriztuan kontzentratu zen. Dekokzioa iragazi, liofilizatu eta 4 °C-tan gordetzen da. Hasierako material gordinaren erauzkin lehorraren etekina %48,13koa izan zen (p/w).

2.2. Errendimendu handiko kromatografia likidoaren (HPLC) analisi kuantitatiboa

Analisi kromatografikoa HPLC sistema batekin (Waters Co., Milford, MA, AEB) eta fotodiodo array detektagailu batekin egin da. SDEren HPLC analisirako, lehen-O-glucosylcimifugin estandarra Medikuntza Tradizionalaren Industriarako Koreako Sustapen Institutuan erosi zen (Gyeongsan, Korea) etaseg-O-glucosylhamaudol eta 4′-O-β-D-glukosil-5-O-methylvisamminol gure laborategian isolatu eta analisi espektralen bidez identifikatu ziren, batez ere RMN eta MS bidez.

SDE laginak (0,1 mg) % 70eko etanolen (10 ml) disolbatu ziren. Bereizketa kromatografikoa XSelect HSS T3 C18 zutabe batekin egin zen (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, AEB). Fase mugikorra azetonitriloz (A) eta %0,1eko azido azetikoz osatuta zegoen uretan (B) 1,0 ml/min-ko emariarekin. Urrats anitzeko programa bat erabili zen honela: % 5 A (0 min), % 5-20 A (0-10 min), % 20 A (10-23 min) eta % 20-65 A (23-40 min). ). Detekzio-uhin-luzera 210-400 nm-ra eskaneatu eta 254 nm-ra grabatu zen. Injekzio bolumena 10,0 izan zenμL. Hiru kromonak zehazteko soluzio estandarrak 7,781 mg/mL-ko azken kontzentrazioan prestatu ziren (prim-O-glukosilzimifugina), 31,125 mg/mL (4′-O-β-D-glukosil-5-O-metilbisaminol), eta 31,125 mg/mL (seg-O-glucosylhamaudol) metanolean eta 4°C-tan mantendu.

2.3. Hanturaren aurkako jardueraren ebaluazioaIn Vitro

2.3.1. Zelula-kultura eta Laginen Tratamendua

RAW 264.7 zelulak American Type Culture Collectiontik (ATCC, Manassas, VA, AEB) lortu ziren eta % 1 antibiotikoak eta % 5,5 FBS zituen DMEM medioan hazi ziren. Zelulak %5 CO2ko atmosfera heze batean inkubatu ziren 37°C-tan. Zelulak estimulatzeko, medioa DMEM euskarri fresko batekin ordezkatu zen, eta lipopolisakaridoarekin (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, AEB) 1ean.μg/mL gehitu zen SDEren presentzian edo ezean (200 edo 400μg/mL) 24 ordu gehiagoz.

2.3.2. Oxido nitrikoa (NO), prostaglandina E2 (PGE2), tumore-nekrosi faktorea-.α(TNF-α), eta Interleukina-6 (IL-6) Ekoizpena

Zelulak SDErekin tratatu eta LPSarekin estimulatu ziren 24 orduz. NO produkzioa aztertu zen, Griess erreaktiboa erabiliz nitritoa neurtuz, aurreko ikerketa baten arabera [12]. PGE2, TNF- hanturazko zitokinen jariapenaα, eta IL-6 ELISA kit (I+G sistemak) erabiliz zehaztu zen fabrikatzailearen argibideen arabera. SDEren ondorioak NO eta zitokinen ekoizpenean 540 nm edo 450 nm-n zehaztu ziren Wallac EnVision erabiliz.™mikroplaken irakurgailua (PerkinElmer).

2.4. Antiosteoartritisaren jardueraren ebaluazioaIn Vivo

2.4.1. Animaliak

Sprague-Dawley arratoi arrak (7 aste) Samtako Inc (Osan, Korea) erosi ziren eta 12 orduko argi/ilun zikloarekin baldintza kontrolatuetan kokatu ziren.°C eta% hezetasuna. Arratoiei laborategiko dieta eta ura eman zitzaienad libitum. Prozedura esperimental guztiak Osasun Institutu Nazionalak (NIH) jarraibideen arabera egin ziren eta Daejeon unibertsitateko Animalien Zainketa eta Erabilera Batzordeak (Daejeon, Koreako Errepublika) onartu zituen.

2.4.2. OAren indukzioa MIArekin Arratoietan

Animaliak ausazko banatu ziren eta tratamendu-taldeetara esleitu ziren azterketa hasi aurretik (talde bakoitzeko). MIA disoluzioa (3 mg/50μ% 0,9ko gatz-L) eskuin belauneko artikulazio barruko espazioan zuzenean injektatu zen ketamina eta xilazina nahasketa batekin eragindako anestesiapean. Arratoiak ausaz lau taldetan banatu ziren: (1) gatz-taldea MIA injekziorik gabe, (2) MIA taldea MIA injekzioarekin, (3) SDE tratatutako taldea (200 mg/kg) MIA injekzioarekin eta (4). ) indometazina- (IM-) tratatutako taldea (2 mg/kg) MIA injekzioarekin. Arratoiak ahoz administratu ziren SDE eta IM-ekin MIA injektatu baino astebete lehenago 4 astez. Ikerketa honetan erabilitako SDE eta IM dosia aurreko ikerketetan erabilitakoetan oinarritzen zen [10,13,14].

2.4.3. Hindpaw-aren pisuaren banaketaren neurketak

OA induzitu ondoren, atzeko hanken pisua jasateko gaitasunaren jatorrizko oreka eten egin zen. Ezintasun-probatzaile bat (Linton instrumentation, Norfolk, Erresuma Batua) erabili zen pisu-jasateko tolerantziaren aldaketak ebaluatzeko. Arratoiak kontu handiz sartu ziren neurketa-ganberan. Atzeko gorputz-adarrak jasaten duen pisuaren indarra 3 s-ko aldian batez bestekoa izan da. Pisuaren banaketa-erlazioa honako ekuazio honen bidez kalkulatu da: [pisua eskuineko atzeko adarrean/(pisua eskuineko atzeko gorputzean + pisua ezkerreko atzeko adarrean)] × 100 [15].

2.4.4. Serum Zitokinen Mailen Neurketak

Odol laginak 1.500 g-tan zentrifugatu ziren 10 minutuz 4°C-tan; ondoren, seruma bildu eta -70 °C-tan gorde zen erabili arte. IL-1 mailakβ, IL-6, TNF-α, eta serumeko PGE2 I+D Systems-en (Minneapolis, MN, AEB) ELISA kitak erabiliz neurtu ziren fabrikatzailearen argibideen arabera.

2.4.5. Denbora errealeko RT-PCR analisi kuantitatiboa

RNA osoa belauneko ehunetik atera zen TRI erreaktiboa erabiliz (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, AEB), alderantziz transkribatu zen cDNAn eta PCR bidez anplifikatu zen TM One Step RT PCR kit batekin SYBR berdearekin (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, AEB). Denbora errealeko PCR kuantitatiboa Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR sistema erabiliz egin da (Applied Biosystems, Grand Island, NY, AEB). Primer sekuentziak eta zunda-sekuentzia taulan agertzen dira1. Laginen cDNAren alikuotak eta GAPDH cDNA kopuru berdina anplifikatu ziren DNA polimerasa zuen TaqMan® Universal PCR nahasketa maisuarekin fabrikatzailearen argibideen arabera (Applied Biosystems, Foster, CA, AEB). PCR baldintzak 2 min 50 °C-tan, 10 min 94 °C-tan, 15 s 95 °C-tan eta 1 min 60 °C-tan 40 ziklotan izan dira. Xede-genearen kontzentrazioa Ct (atalasearen ziklo-zenbakia anplifikazio grafikoaren eta atalasearen arteko gurutze-puntuan) metodo konparatiboa erabiliz zehaztu zen, fabrikatzailearen argibideen arabera.

FOB prezioa:US $ 0,5 - 9.999 / Pieza

Gutxieneko eskaera kopurua:100 Pieza/Pieza

Hornikuntzarako gaitasuna:10000 Pieza/Pieza Hilero

Bidali mezu elektronikoa

Produktuaren xehetasuna

Produktuen etiketak

Osteoartritisa (OA) muskuloeskeletoaren nahasterik ohikoena da eta adinekoen endekapenezko artikulazio-gaixotasun ohikoena da.1]. OA lesioak, kartilagoaren egitura eta funtzioaren galerak eta proinflamatorio eta antiinflamatorio bideen desregulazioak eragindako egoera da.2,3]. Batez ere giltzadura sinobialetako kartilago artikularrean eta subkondralean eragiten du eta giltzaduraren porrota eragiten du, pisua jasaten denean, ibiltzea eta zutik egotea barne.4].

Ez dago OAren sendabiderik, oso zaila baita kartilagoa berreskuratzea suntsitu ondoren [5]. Tratamenduaren helburuak hauek dira: mina arintzea, artikulazioen mugikortasuna mantentzea edo hobetzea, artikulazioen indarra areagotzea eta gaixotasunaren ondorio ezgaigarriak gutxitzea. OAren tratamendu farmakologikoek mina murriztea dute helburu, pazientearen artikulazio-funtzioa eta bizi-kalitatea areagotzeko. Kartilagoa suntsitzea OAren gertaera nagusia den arren, kolagenoaren degradazioa hanturarekin batera OAren progresio itzulezina zehazten duen oinarrizko gertakaria da.6,7]. Antiinflamatorio eta kondroprotekzio jarduera duten tratamenduek mina arintzea eta matrizearen osotasuna mantentzea espero da OA pazienteetan.

Hori dela eta, hantura murriztea onuragarria izango da OA kudeaketan. Azken ikerketek iradokitzen dute belar-baliabideen babes-eginkizunak OAren progresioan, kondrozitoen hantura arintzeari eta kartilago gehiago suntsitzeari dagokionez, artikulazioekin lotutako ehunekin elkarreragiteko duten gaitasunaren bidez, eta ondorioz, artikulazioetako mina arintzen da.8].

ren erroaSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) medikuntza tradizionalean oso erabilia izan da Korea eta Txinan buruko mina, mina, hantura eta artritisa tratatzeko.9,10]. Eragin farmakologiko anitzakSaposhnikovia divaricata(SD) propietate antiinflamatorioak, analgesikoak, antipiretikoak eta antiartritikoak ere hartzen dituzte [9,11]. Azken ikerketa batek frogatu zuen SD kromona estraktuak artritis erreumatoidearen aurkako efektu potentzialak dituela kolagenoak eragindako artritisaren saguaren eredu batean.10]; hala ere, ikerketa gutxi egin dira antiinflamatorio eta artritisaren jarduera onartzen dutenSaposhnikovia divaricataatera (SDE).

Hori dela eta, ikerketa honek SDren % 70eko etanol-estraktu baten antiinflamatorio eta antiosteoartritisaren jarduerak ikertu ditu. Lehenik eta behin, SDEren antiinflamatorioaren eragina ebaluatu zenin vitroLPSak eragindako RAW 264.7 zeluletan. Ondoren, SDEren antiosteoartritisaren eragina neurtu zen pisu-jasaketaren banaketa, kartilago artikularraren degradazioa eta hanturazko erantzunak ebaluatuz iodoacetato monosodikoaren (MIA-) eragindako OA arratoi-eredu batean.